应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR电泳图求助！
91/1返回列表
查看: 807  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

jiangkuo0520

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR电泳图求助！

预计目的片段大小应该在850，电泳，如图，新手大家帮我看下，有些不懂！
第二道是MARKER DL2000
第三道是PCR产物

[ Last edited by jiangkuo0520 on 2010-1-21 at 21:06 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-01-21 20:29:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

默默的等待

金虫 (正式写手)
兄弟 你想问什么啊  不明白 具体点
赞一下 回复此楼
2楼2010-01-21 20:39:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cavafory

铁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
jiangkuo0520(金币+2,VIP+0):谢谢！阴性对照怎么做啊？ 能具体点说吗？ 1-21 21:05
amisking(金币+3,VIP+0): 1-21 21:05
“在已有片段上2次延伸，共延伸了66BP”什么意思，你的目的片段只有66个碱基？做了两个循环？如果只有两个循环，那你的结果就好奇怪

但是你的图看起来很漂亮啊，看起来是你有个约750bp的目的带，下面的大概是引物二聚体，你的引物可以减少点量，上面的带是你的模板加多了

另外做PCR时记得做阴性对照，有时候有假阳性
赞一下(20人) 回复此楼
3楼2010-01-21 20:52:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙中清泉

木虫 (正式写手)
这图怎么拍的
回复此楼
4楼2010-01-21 21:14:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cavafory

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
阴性对照是为了看你的体系对不对，有没有污染的情况存在，你可以将你的体系内的任何一种东西用无菌水代替，但是一般是以不加含有目的带的模板作为阴性对照
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-01-21 21:16:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangkuo0520

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 沙中清泉 at 2010-1-21 21:14:
这图怎么拍的

科里的凝胶成像仪不大好用，在紫外灯下看效果比这能好一些，拍完图，我用QQ截图弄成这个大小，传上来了！
赞一下 回复此楼
6楼2010-01-21 21:22:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangkuo0520

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by cavafory at 2010-1-21 20:52:
“在已有片段上2次延伸，共延伸了66BP”什么意思，你的目的片段只有66个碱基？做了两个循环？如果只有两个循环，那你的结果就好奇怪

但是你的图看起来很漂亮啊，看起来是你有个约750bp的目的带，下面的大概是引 ...

模板是我的PCR产物，会产生上面那条带吗？
赞一下 回复此楼
7楼2010-01-21 21:24:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amilie030312

金虫 (正式写手)
是二次PCR结果吧。第一你的一次PCR产物稀释的不够，导致二次PCR模版太浓了；第二下面是引物二聚体，说明你引物设计的不是很好，但不影响实验结果；第三目的片段在750bp，也有可能是你的目的片段，因为DL2000的Marker在750-1000的区域距离太近了，看的都不是很明显；第四，2000以上还有片段，说明引物不特异，还能够扩增出其他片段出来，但片段那么大也不会影响你结果。以上所有说的不影响结果是针对你不是做定量，只做普通PCR才会不影响，否则引物二聚体和非特异扩增都会影响染料法定量的结果。
赞一下 回复此楼
8楼2010-01-22 14:48:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangkuo0520

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by amilie030312 at 2010-1-22 14:48:
是二次PCR结果吧。第一你的一次PCR产物稀释的不够，导致二次PCR模版太浓了；第二下面是引物二聚体，说明你引物设计的不是很好，但不影响实验结果；第三目的片段在750bp，也有可能是你的目的片段，因为DL2000的Mar ...

精辟！！
回复此楼
9楼2010-01-22 19:17:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jiangkuo0520 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 什么时候开奖？ +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭