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cui00008

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】植物rna提取问题,天根的试剂盒,帮忙分析一下 已有3人参与

提取月季幼嫩叶片的RNA,材料是3周前菜的,液氮处理后,-80保存,用天根的植物提取试剂盒,全部在超净台操作,药品DEPC水配置,器皿160°烘烤3小时,枪头用0.5M的NaOH浸泡10min,无菌水清洗,高压灭菌两次,烘干,电泳仪用酒精擦洗。做了几次,结果都不好。帮忙分析一下
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amilie030312

金虫 (正式写手)

用氢氧化钠是在做DNA实验的时候去除残留RNA的。在提总RNA的时候是要用DEPC水泡枪头和管子的,泡一夜然后再高压烘干后使用,所有金属和玻璃的器具用200度烘四个小时后使用。如果还不行就用个去多酚多糖的试剂盒去除一下植物的杂质就没问题了。做实验的时候勤换手套尽量快的操作。
18楼2010-04-15 16:39:35
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jasco

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1,VIP+0): 1-19 18:06
植物rna提取确实比较难,主要多糖多酚物质太多,有些用takara或者invitrogen植物提取试剂就行,有些还是得用ctab法提取。

你电泳前两个rna降解了,后4个杂质太多。建议你将每份材料用量减少一半再试试看,
2楼2010-01-19 14:12:44
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

后四个可能可以用,但前两个肯定是降解了
3楼2010-01-19 19:18:11
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wwyy0818

新虫 (小有名气)

枪头要用DEPC泡,大哥...............
另外,你的RNA全部降解
4楼2010-01-20 08:46:33
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