24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1623  |  回复: 17
当前主题已经存档。

cui00008

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】植物rna提取问题,天根的试剂盒,帮忙分析一下 已有3人参与

提取月季幼嫩叶片的RNA,材料是3周前菜的,液氮处理后,-80保存,用天根的植物提取试剂盒,全部在超净台操作,药品DEPC水配置,器皿160°烘烤3小时,枪头用0.5M的NaOH浸泡10min,无菌水清洗,高压灭菌两次,烘干,电泳仪用酒精擦洗。做了几次,结果都不好。帮忙分析一下
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1,VIP+0): 1-19 18:06
植物rna提取确实比较难,主要多糖多酚物质太多,有些用takara或者invitrogen植物提取试剂就行,有些还是得用ctab法提取。

你电泳前两个rna降解了,后4个杂质太多。建议你将每份材料用量减少一半再试试看,
2楼2010-01-19 14:12:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)

后四个可能可以用,但前两个肯定是降解了
3楼2010-01-19 19:18:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wwyy0818

新虫 (小有名气)

枪头要用DEPC泡,大哥...............
另外,你的RNA全部降解
4楼2010-01-20 08:46:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

割麦者

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也用天根的试剂盒提取植物的RNA,
效果真的不错
楼主的结果肯定是RNA降解太厉害了。
楼上说的对,枪头也应该用DEPC水泡过夜。离心管也应该处理。
不知道楼主做实验是否有常换手套的习惯?这个习惯在提取RNA实验中可是必须的……
还有植物组织研磨过程是否保持液氮没有完全挥发?
5楼2010-01-20 09:17:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tuodecai

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我们也是用天根的提的  可效果确实不错哆  我觉得这磨样的什么很关键,要快还要磨得细,不要让其潮解。还有不知道你的样品处理会不有问题,最好是采新鲜的样品。还有注意下操作,常换手套,还要载口罩。其它的我觉得问题就不大了。
6楼2010-01-20 10:01:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cui00008

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-1-19 19:18:
后四个可能可以用,但前两个肯定是降解了

恩,谢谢,试剂盒里的离心管什么的,还要消毒吗?
7楼2010-01-21 14:35:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cui00008

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by tuodecai at 2010-1-20 10:01:
我们也是用天根的提的  可效果确实不错哆  我觉得这磨样的什么很关键,要快还要磨得细,不要让其潮解。还有不知道你的样品处理会不有问题,最好是采新鲜的样品。还有注意下操作,常换手套,还要载口罩。其它的我觉 ...

带着液氮的时候磨不细啊,就是在最后挥发完的时候才能磨细,样品采后,在液氮内速冻几分钟,才能放-80冰箱?试剂盒里带的离心管什么还要消毒吗?
8楼2010-01-21 14:39:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cui00008

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 割麦者 at 2010-1-20 09:17:
我也用天根的试剂盒提取植物的RNA,
效果真的不错
楼主的结果肯定是RNA降解太厉害了。
楼上说的对,枪头也应该用DEPC水泡过夜。离心管也应该处理。
不知道楼主做实验是否有常换手套的习惯?这个习惯在提取RNA实 ...

你们怎么加液氮到研钵的,我要自己用液氮罐倒,不太方便。样品采后要速冻几分钟,才能放冰箱?试剂盒里带的离心管,过滤头什么的,要灭菌吗?
9楼2010-01-21 14:43:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzw1221

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
没个舀子什么的吗,枪头DEPC水处理,手套口罩!
呵呵,沉淀的时间可以稍微长点。看能不能好点!
10楼2010-01-21 14:59:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 cui00008 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 307中医考研调剂 +7 于以采蘩 2026-04-14 7/350 2026-04-19 07:17 by 路病情
[考研] 291求调剂 +10 关忆北. 2026-04-14 10/500 2026-04-18 23:32 by 路病情
[考研] 生物学调剂 +10 纸扇zhishan 2026-04-13 10/500 2026-04-18 21:19 by zqndavala
[考研] 接受任何调剂 +6 也就是栗子 2026-04-17 7/350 2026-04-18 17:20 by 涵竹刘
[考研] 22408 312求调剂 +24 门路摸摸 2026-04-14 26/1300 2026-04-18 13:04 by wunaiy88
[考研] 化工学硕294分,求导师收留 +33 yzyzx 2026-04-12 37/1850 2026-04-17 23:00 by wunaiy88
[考研] 求调剂 +9 小聂爱学习 2026-04-16 11/550 2026-04-17 22:34 by chixmc
[考研] 304求调剂 +7 castLight 2026-04-16 7/350 2026-04-17 20:05 by 关一盏灯cd
[考博] 求博导|生物质基多孔碳/超级电容方向,已有相关成果,寻能源材料/碳材料方向老师 +3 猪猪人Zzz 2026-04-12 3/150 2026-04-17 19:10 by 阳阳阳^_^
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
[考研] 26药学专硕105500求调剂 +6 喽哈加油 2026-04-13 7/350 2026-04-16 14:31 by zhouxiaoyu
[考研] 求调剂推荐 +8 小聂爱学习 2026-04-14 8/400 2026-04-16 07:22 by 学员JpLReM
[教师之家] 转长聘了 +7 简单化xn 2026-04-13 7/350 2026-04-14 14:50 by xindong
[考研] 食品与营养(0955)271求调剂 +15 升格阿达 2026-04-12 16/800 2026-04-14 13:18 by 浮若_安生
[考研] 245求调剂 +6 冰糖橘?汽水 2026-04-13 10/500 2026-04-14 10:49 by jyl0317
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +24 叶zilin 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 09:20 by 试管破裂
[考研] 一志愿中南大学 0855 机械 286 求调剂 +11 不会吃肉 2026-04-12 11/550 2026-04-13 21:59 by bljnqdcc
[考研] B区0809 ,数一英一,290 求调剂 +3 泠潍1111 2026-04-12 4/200 2026-04-13 20:35 by 学员JpLReM
[考研] 339求调剂 +4 hanwudada 2026-04-12 4/200 2026-04-13 12:03 by 蓝云思雨
[考研] +10 李多米lee. 2026-04-12 11/550 2026-04-12 22:58 by yuyin1233
信息提示
请填处理意见