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二马宇飞

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】腹腔肥大细胞

我不是学免疫的,请教各位,我想取大鼠腹腔肥大细胞,怎么取,纯度好,又方便,最好详细一点,因为我看文献,有的地方看不懂,比如说重悬细胞是什么意思,又如下面一段话:正常动物颈动脉放血处死,用预冷的不含钙的
台氏液10 mL腹腔注射,轻轻按摩腹部2 min,打开腹
腔,吸取腹腔冲洗液,4℃,1 500 r/min离心4 min,取
细胞悬液,缓慢加入30%:80%的Percoll梯度分离液
中,4℃,2 500 r/min离心15 min,用台氏液洗2次,
(4℃,1 000 r/min离心10 min),收集界面细胞,镜下
计数,调细胞浓度至108个细胞/L。台盼蓝染色,活
力大于95%,甲苯胺蓝染色,纯度大于95%,置于含
10%小牛血清的RPMI1640培养液中悬浮备用。
其中的用台氏液洗的是哪部分,怎么还离心呢,离心怎么洗啊?
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momocy

铁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
重悬细胞。。。就是重新悬浮细胞,读chong,不读zhong。

看文章,就是冲洗腹腔啊,把细胞洗出来,按摩也是这个目的。
2楼2010-01-14 23:31:22
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二马宇飞

新虫 (初入文坛)

缓慢加入30%:80%的Percoll梯度分离液
中,4℃,2 500 r/min离心15 min,用台氏液洗2次,
(4℃,1 000 r/min离心10 min),收集界面细胞,
那加入到PERCOLL梯度分离液中离心之后,用台氏液洗2次,洗的是哪部分,怎么洗还要离心呢,
另外甲苯胺蓝和台盼蓝染色有什么区别呢
3楼2010-01-15 18:09:29
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zzydlc123

新虫 (初入文坛)

师姐吧
4楼2010-03-16 21:49:25
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