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【求助】腹腔肥大细胞
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我不是学免疫的,请教各位,我想取大鼠腹腔肥大细胞,怎么取,纯度好,又方便,最好详细一点,因为我看文献,有的地方看不懂,比如说重悬细胞是什么意思,又如下面一段话:正常动物颈动脉放血处死,用预冷的不含钙的 台氏液10 mL腹腔注射,轻轻按摩腹部2 min,打开腹 腔,吸取腹腔冲洗液,4℃,1 500 r/min离心4 min,取 细胞悬液,缓慢加入30%:80%的Percoll梯度分离液 中,4℃,2 500 r/min离心15 min,用台氏液洗2次, (4℃,1 000 r/min离心10 min),收集界面细胞,镜下 计数,调细胞浓度至108个细胞/L。台盼蓝染色,活 力大于95%,甲苯胺蓝染色,纯度大于95%,置于含 10%小牛血清的RPMI1640培养液中悬浮备用。 其中的用台氏液洗的是哪部分,怎么还离心呢,离心怎么洗啊? |
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