| 查看: 3270 | 回复: 12 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
gentledragon金虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助】肝微粒体不代谢--急死人啦 已有5人参与
|
||
|
求教肝微粒体体外代谢实验问题： 我从sigma订购的鼠肝微粒体M9066，NADPH，按照文献报道的方法试验却发现检测不到代谢产物，底物量也不见减少。请同道中人指教，不胜感激！ 为了鉴定乌头碱的体外代谢产物，0.5ml反应体系含150mM Tris-HCl 缓冲液（pH=7.4），5mM MgCl2， 1mg/ml 微粒体蛋白和40uM乌头碱，反应体系在37度预孵育3分钟后，向体系中加入50uL NADPH（20mM/L）启动反应，震荡水浴上孵育60分钟，而后向体系中加入4mL冰冷的二氯甲烷终止反应，涡旋震荡后4500g离心10分钟，取有机相3.5mL氮气吹干，而后用250uL流动相溶解进样。 按此法操作后，并未像文献中报道的那样发生代谢，而后改进缓冲液，即向缓冲液中加入甘油/EDTA/DTT，仍未见代谢发生，又有人说向体系中饱和氧气会好些，依法做后仍未见代谢，遂求高人指教！ |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有5人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有4人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有6人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有3人回复
11楼2011-12-09 13:05:53
3楼2010-01-08 18:22:15
ronaldoli198311
至尊木虫 (正式写手)
- 应助: 14 (小学生)
- 金币: 10401.1
- 红花: 3
- 帖子: 788
- 在线: 191.9小时
- 虫号: 541442
- 注册: 2008-04-07
- 性别: GG
- 专业: 太阳和太阳系
4楼2010-01-09 15:45:04
gentledragon
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 984.2
- 帖子: 439
- 在线: 35.6小时
- 虫号: 481447
- 注册: 2007-12-17
- 性别: GG
- 专业: 质谱分析
5楼2010-01-12 21:31:30
