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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】诱导表达的蛋白偏大，原因何在？
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谁知道

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】诱导表达的蛋白偏大，原因何在？

大家好，我诱导表达的His融合蛋白是12KDa，但电泳和western结果均显示条带大小在15KDa左右，这是为什么啊？新手，有好多不懂，希望大家能多多指教啊！是原核表达，且目的蛋白源于大肠杆菌。
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每个人一辈子从来都是一个人
1楼 2010-01-08 09:37:55
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刘超_2009

新虫 (小有名气)
不太理解，静待答案
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2楼2010-01-08 09:46:13
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
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1949stone(金币+1,VIP+0): 1-20 17:43
你测过蛋白有活性没有，是不是DNA序列出现问题，出现移位突变或者翻译该终止的时候没有终止啊，最好是测测序，确保序列是正确的----
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼2010-01-08 10:03:38
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0): 1-20 17:43
带电荷氨基酸过多，脯氨酸过多，都会导致迁移率变小。
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4楼2010-01-08 10:48:18
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谁知道

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by nicknelson at 2010-1-8 10:48:
带电荷氨基酸过多，脯氨酸过多，都会导致迁移率变小。

嗯，那么偏离2-3kDa是否可以接受呢？有必要做质谱分析么？
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每个人一辈子从来都是一个人
5楼2010-01-20 17:25:43
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
偏离2-3kDa正常，做功能比做质谱跟更有意义
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6楼2010-01-20 20:47:01
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biogefart

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
SDS-PAGE不是精确定量分子量的手段
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闹太套
7楼2010-01-20 20:56:38
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谁知道

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhaocy8903 at 2010-1-20 20:47:
偏离2-3kDa正常，做功能比做质谱跟更有意义

在蛋白电泳胶上目的条带总是位于低分子量Marker的20kDa和14kDa之间，如果发文章用这样的电泳图不行吧？我的目的蛋白才13kDa，应该在14kDa下面才有说服力啊。
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每个人一辈子从来都是一个人
8楼2010-01-20 22:22:25
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
小分子用tricine电泳吧。
好像更清楚一些。
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VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
9楼2010-01-21 08:24:51
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