24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 1057  |  回复: 8
当前主题已经存档。

谁知道

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】诱导表达的蛋白偏大,原因何在?

大家好,我诱导表达的His融合蛋白是12KDa,但电泳和western结果均显示条带大小在15KDa左右,这是为什么啊?新手,有好多不懂,希望大家能多多指教啊!是原核表达,且目的蛋白源于大肠杆菌。
回复此楼
每个人一辈子从来都是一个人
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘超_2009

新虫 (小有名气)

不太理解,静待答案
2楼2010-01-08 09:46:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1,VIP+0): 1-20 17:43
你测过蛋白有活性没有,是不是DNA序列出现问题,出现移位突变或者翻译该终止的时候没有终止啊,最好是测测序,确保序列是正确的----
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼2010-01-08 10:03:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nicknelson

至尊木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1,VIP+0): 1-20 17:43
带电荷氨基酸过多,脯氨酸过多,都会导致迁移率变小。
4楼2010-01-08 10:48:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谁知道

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by nicknelson at 2010-1-8 10:48:
带电荷氨基酸过多,脯氨酸过多,都会导致迁移率变小。

嗯,那么偏离2-3kDa是否可以接受呢?有必要做质谱分析么?
每个人一辈子从来都是一个人
5楼2010-01-20 17:25:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
偏离2-3kDa正常,做功能比做质谱跟更有意义
6楼2010-01-20 20:47:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biogefart

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
SDS-PAGE不是精确定量分子量的手段
闹太套
7楼2010-01-20 20:56:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谁知道

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zhaocy8903 at 2010-1-20 20:47:
偏离2-3kDa正常,做功能比做质谱跟更有意义

在蛋白电泳胶上目的条带总是位于低分子量Marker的20kDa和14kDa之间,如果发文章用这样的电泳图不行吧?我的目的蛋白才13kDa,应该在14kDa下面才有说服力啊。
每个人一辈子从来都是一个人
8楼2010-01-20 22:22:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
小分子用tricine电泳吧。
好像更清楚一些。
生物资源交流QQ群:1044518333
9楼2010-01-21 08:24:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 谁知道 的主题更新
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见