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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】SDS-PAGE浓缩胶起不到浓缩效果怎么回事？
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cornerqian

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE浓缩胶起不到浓缩效果怎么回事？

糖蛋白每次上样后，样品跑完浓缩胶（6%）总是压不成线，几乎是原来的样子，这是怎么回事啊？会影响结果嘛？怎么改善呢？谢谢各位了！
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1楼 2010-01-06 11:28:08
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这个常见，经常见他们跑的也是弯弯扭扭，不怎么影响结果，只是太难看拿不出门。浓缩胶的浓度与你蛋白质大小相关；另外跑浓缩胶是电流一般较低。
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
2楼2010-01-06 11:54:37
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1514132

至尊木虫 (著名写手)
糖蛋白粘度大，需要特殊处理。
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3楼2010-01-06 15:43:27
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wwyy0818

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你样品的离子强度是一样吗？
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4楼2010-01-06 15:44:47
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yjl_df

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
首先要确定你的浓缩胶缓冲液的PH是否正确，其次就是样品处理中SDS是否充分和蛋白结合。
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5楼2010-01-06 15:56:43
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cornerqian

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 1514132 at 2010-1-6 15:43:
糖蛋白粘度大，需要特殊处理。

应该怎么处理呢？
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6楼2010-01-06 15:58:44
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cornerqian

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by fungixx at 2010-1-6 11:54:
这个常见，经常见他们跑的也是弯弯扭扭，不怎么影响结果，只是太难看拿不出门。浓缩胶的浓度与你蛋白质大小相关；另外跑浓缩胶是电流一般较低。

我用的是恒压80v，这时候电流一般50-60mA，是不是有点大啊？那电压应该调多少呢？我试着降低过电压，效果也不怎么好。
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7楼2010-01-06 16:00:58
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cornerqian

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yjl_df at 2010-1-6 15:56:
首先要确定你的浓缩胶缓冲液的PH是否正确，其次就是样品处理中SDS是否充分和蛋白结合。

pH调过很多次了，怎么确定样品处理中SDS充分和蛋白结合呢？
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8楼2010-01-06 16:02:11
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