| 查看: 945 | 回复: 7 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
[交流]
【求助/交流】GST标签蛋白纯化的问题
|
|||
| 本人最近在纯化一个蛋白（62kd），要求蛋白有活性，先将目的蛋白的基因连到了Pgex5-1的载体上，带GST纯化标签的载体，小量诱导成功，在大量收菌后，发现蛋白是在沉淀包涵体中的，着实郁闷了，不过还是按照分子克隆上的溶解包涵体的步骤将蛋白变成可溶的了。问题是在过GST的柱子之后跑胶发现蛋白基本上就没纯化到。刚开始以为是过柱子流速太快可能没挂住，之后将速度减低很多，结果还是不理想，我同时做的另一个蛋白（35kd）也是同样的方法纯化的就很好，重复做了几次都是这样，我很纳闷为什么这个蛋白就是纯化不到。各位高手指点一下吧！ |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有177人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
2楼2010-01-03 12:28:41
hihoney 
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 6375.7
- 散金: 314
- 红花: 4
- 帖子: 3325
- 在线: 445.1小时
- 虫号: 349053
- 注册: 2007-04-19
- 性别: GG
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
3楼2010-01-04 11:59:58
jasco
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 1626.1
- 红花: 3
- 帖子: 991
- 在线: 82小时
- 虫号: 287776
- 注册: 2006-10-21
- 专业: 生物化学
4楼2010-01-04 15:00:06
5楼2010-01-04 23:31:42
6楼2010-01-05 08:54:24
刘超_2009
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 54.6
- 散金: 1
- 帖子: 124
- 在线: 12.4小时
- 虫号: 826582
- 注册: 2009-08-12
- 性别: GG
- 专业: 药物化学
。弱问一下，构建表达载体以及优化表达条件时，怎样才能确保蛋白的可溶性表达呢？谢谢 7楼2010-01-05 10:36:41
snoopyzxx
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 4
- 应助: 49 (小学生)
- 金币: 2994.6
- 散金: 1276
- 红花: 43
- 帖子: 2258
- 在线: 277.2小时
- 虫号: 548497
- 注册: 2008-04-19
- 性别: MM
- 专业: 全球变化生态学
8楼2010-01-05 10:44:15
