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yxx41

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR扩增问题:非特异条带! 已有6人参与

用报道的引物进行PCR,但是出现了很多非特异性条带:
泳道          模板              退火温度
1             cDNA              60
2             cDNA              58
3             cDNA              54
4             菌1总DNA       60
5             同上                 58
6            marker DL 2000
7             菌1总DNA       54
8             菌2总DNA       60
9                   同上           58
10                 同上           54

原因是何?如何解决?
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内事不决问百度,外事不决问Google,横批:wikipedia
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
yxx41(金币+3,VIP+0): 1-1 10:02
1、建议退火温度范围在向上设置几度试试。看你的图好像也是温度越低,特异性越差啊。
2、个人认为虽然国外的文献可信度比较高,但也不能全信,国内国外造假的都大量存在。所以可能是报道的引物不可信。建议自己设计,文献只是参考。
生物资源交流QQ群:1044518333
7楼2009-12-31 21:27:18
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