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汕头大学海洋科学接受调剂
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fly9081

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教:关于克隆的问题

请教大家,在做亚克隆表达设计引物时,在引物两端加酶切位点,但如果此酶切位点与T载体(TA克隆)上的酶切位点有相同的,对之后的酶切会有影响吧?但怎么一般没考虑这点呢?
谢谢大家!
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liuyanyy

新虫 (正式写手)

肯定要考虑这种情况,最好能切出的所有片段大小有明显的差别,这样电泳就能很容易收到目的条带,至于把T载体切碎都无所谓了。
6楼2010-01-01 10:21:21
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dcb005

金虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
肯定会的
酶又不认识谁是谁的?
★穷则独善其身,达则兼济天下★
2楼2009-12-30 21:22:18
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dcb005

金虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by fly9081 at 2009-12-30 20:55:
请教大家,在做亚克隆表达设计引物时,在引物两端加酶切位点,但如果此酶切位点与T载体(TA克隆)上的酶切位点有相同的,对之后的酶切会有影响吧?但怎么一般没考虑这点呢?
谢谢大家!

但都切开了,只要挖胶回收gene片段
应该就是你加上酶切位点的片段
★穷则独善其身,达则兼济天下★
3楼2009-12-30 21:24:32
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
最好不要这样做吧,最好用simple的T载体。
5楼2009-12-30 22:59:56
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