24小时热门版块排行榜    

查看: 319  |  回复: 5
当前主题已经存档。

fly9081

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教:关于克隆的问题

请教大家,在做亚克隆表达设计引物时,在引物两端加酶切位点,但如果此酶切位点与T载体(TA克隆)上的酶切位点有相同的,对之后的酶切会有影响吧?但怎么一般没考虑这点呢?
谢谢大家!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dcb005

金虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
肯定会的
酶又不认识谁是谁的?
★穷则独善其身,达则兼济天下★
2楼2009-12-30 21:22:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dcb005

金虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by fly9081 at 2009-12-30 20:55:
请教大家,在做亚克隆表达设计引物时,在引物两端加酶切位点,但如果此酶切位点与T载体(TA克隆)上的酶切位点有相同的,对之后的酶切会有影响吧?但怎么一般没考虑这点呢?
谢谢大家!

但都切开了,只要挖胶回收gene片段
应该就是你加上酶切位点的片段
★穷则独善其身,达则兼济天下★
3楼2009-12-30 21:24:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fly9081

铁虫 (小有名气)

恩 谢谢大家帮助
4楼2009-12-30 22:30:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
最好不要这样做吧,最好用simple的T载体。
5楼2009-12-30 22:59:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuyanyy

新虫 (正式写手)

肯定要考虑这种情况,最好能切出的所有片段大小有明显的差别,这样电泳就能很容易收到目的条带,至于把T载体切碎都无所谓了。
6楼2010-01-01 10:21:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fly9081 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 310求调剂 +4 baibai1314 2026-03-16 4/200 2026-03-22 20:19 by edmund7
[考研] 287求调剂 +8 晨昏线与星海 2026-03-19 9/450 2026-03-22 17:01 by i_cooler
[考研] 318求调剂 +4 plum李子 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:17 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 0805 316求调剂 +3 大雪深藏 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:55 by 学员8dgXkO
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 070300化学319求调剂 +7 锦鲤0909 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:46 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +3 Jack?k?y 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:17 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中国石油大学(华东) 本科齐鲁工业大学 +3 石能伟 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:22 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交大,求调剂 +5 材化逐梦人 2026-03-18 5/250 2026-03-21 00:26 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 085600材料与化工 +8 安全上岸! 2026-03-16 8/400 2026-03-20 22:13 by luoyongfeng
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[考研] 材料与化工专硕调剂 +7 heming3743 2026-03-16 7/350 2026-03-20 19:31 by zhukairuo
[考研] 一志愿中国海洋大学,生物学,301分,求调剂 +5 1孙悟空 2026-03-17 6/300 2026-03-19 23:46 by zcl123
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
信息提示
请填处理意见