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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教ELISA能不能测试有色的样品？
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VeroE6

金虫 (正式写手)

007小丑鱼

[交流] 【求助/交流】请教ELISA能不能测试有色的样品？

如题，我的抗体样品是用罗丹明荧光标记过的，样品溶液是粉色，现在需要用ELISA测这个样品中的抗体含量，但是粉红色的罗丹明会影响最终的比色测定，这样还能进行定量测试吗？
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1楼 2009-12-25 15:54:33
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duke-007

木虫 (著名写手)
★
VeroE6(金币+1,VIP+0):谢谢指点！ 12-29 09:04
应该是可以的，你只需做一个类似于扣除空白的实验就可以了。
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2楼2009-12-25 16:30:26
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jasco

木虫 (正式写手)
★
VeroE6(金币+1,VIP+0):谢谢指教 12-29 09:04
设置好阴性对照
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3楼2009-12-25 16:55:39
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liudaihualyh

金虫 (小有名气)
★
VeroE6(金币+1,VIP+0):谢谢！被测液的吸收是450nm，粉色的最大吸收在550nm，但是在450nm也有吸收。 12-29 09:39
你用紫外扫描一下你的粉色的波长，然后你的这个被测试剂的波长是多少？
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4楼2009-12-25 21:33:45
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
VeroE6(金币+1,VIP+0):谢谢！如果在吸收峰比较接近就不好扣除了是吗？ 12-29 10:04
只要两个吸收峰离得足够远，那么扣除一下背景就ok了
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5楼2009-12-25 21:38:34
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VeroE6

金虫 (正式写手)

007小丑鱼
谢谢以上四位的指点！
现在主要的问题是抗体结合了有色基团，在检测的过程中会结合到体系内，而单纯在溶液里面加入对照并不能结合，所以不能起到扣除背景的作用。
看了大家的建议很有启发，我准备用单纯的有色标记分子做一条标准曲线来扣背景，看看是不是能奏效。
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6楼2009-12-29 10:15:11
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