24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 608  |  回复: 9
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

chener

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求助:好点的反转录酶

最近通过RACE 拿到一个基因的5’ 和 3’ 端,现在想克隆这个基因的全长cDNA,有2800多bp,用常规的M-MLV反转录酶和dT18反转录总是不能扩增到全长,原因可能是反转录的时候没有延伸到5’ 端,所以想请教大家有没碰到过类似的问题,能不能推荐一个效率比较高的反转录酶。

[ Last edited by amisking on 2009-12-24 at 12:40 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amisking

荣誉版主 (文坛精英)

优秀区长优秀版主


chener(金币+1,VIP+0): 12-24 16:09
好像前一段时间也有人联系我要公司信息!
如果没有人帮助你,那么你就去帮助别人。
4楼2009-12-24 13:07:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

amilie030312

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 12-24 12:40
chener(金币+2,VIP+0): 12-24 16:09
我原来用Stratagene公司有一个高保真的反转录酶,长度肯定没问题的,我记得看过好像是反转录20K都可以。
2楼2009-12-24 12:37:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gastrodia

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 12-24 13:06
chener(金币+2,VIP+0): 12-24 16:09
2.8K也不算很长啊,何况你RACE是分5’和3‘两方面进行的,你是用哪种RACE,即使是RACE,各家公司也是不尽相同的,你RNA的质量如何,
我做RACE用的就是MMLV(CLONTECH),
3楼2009-12-24 12:47:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chener

金虫 (小有名气)

我是先拿到这个基因的一段中间序列,再通过RACE分别拿到这个基因的5’ 和3’ 部分,包括UTR,RACE是用Kit做的。现在我想拿到这个基因的全长cDNA,用常规的M-MLV和dT18反转录,再在5’ UTR和3’ UTR区设计引物扩增,总是扩增不到完整的片段。所以怀疑是反转录酶不够好。因为我用了好几对引物扩都不行。
5楼2009-12-24 13:38:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 302求调剂 +10 易!? 2026-04-13 10/500 2026-04-13 19:04 by lbsjt
[考研] 材料复试求调剂 +24 xhhdjdjsjks 2026-04-09 24/1200 2026-04-13 15:49 by 幸免 ..
[考研] 一志愿0807 数一英一 313 有没有二轮调剂 +12 emokidd 2026-04-08 13/650 2026-04-13 08:32 by lhj2009
[考研] 0859,337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 11:34 by caotw2020
[考研] 283求调剂 +22 那个噜子 2026-04-09 22/1100 2026-04-11 10:41 by 逆水乘风
[考研] 311求调剂 +13 xyp想读书 2026-04-10 14/700 2026-04-11 09:41 by 猪会飞
[考研] 中药学调剂 初试324 +4 洋甘菊、 2026-04-10 6/300 2026-04-11 09:41 by gong120082
[考研] 342电子信息专硕求调剂 +9 你让我怎么荔枝 2026-04-10 10/500 2026-04-11 08:33 by zhq0425
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +6 白云123456789 2026-04-09 8/400 2026-04-10 21:13 by zhouxiaoyu
[考研] 368求调剂 +3 17385968172 2026-04-10 3/150 2026-04-10 20:12 by 电子奥德彪
[考研] 0858求调剂 5+5 Gky09300550, 2026-04-10 8/400 2026-04-10 19:13 by chemisry
[考研] 314求调剂 +18 xhhdjdjsjks 2026-04-09 19/950 2026-04-10 18:53 by HPUCZ
[考研] 285求调剂 +9 AZMK 2026-04-07 11/550 2026-04-10 15:24 by AZMK
[考研] 调剂 +19 2261744733 2026-04-08 19/950 2026-04-09 19:11 by vgtyfty
[考研] 一志愿中科院105500专业总分315求调剂 +6 lallalh 2026-04-09 7/350 2026-04-09 17:51 by lallalh
[论文投稿] 求助文献原文 10+3 18500821399 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:56 by 北京莱茵润色
[考研] 材料工程322 +18 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-07 19/950 2026-04-09 10:44 by cymywx
[考研] 招收有机化学、化工,药学,食品灯专业学生 +3 yrfhjgdj 2026-04-08 3/150 2026-04-09 10:15 by QYQX_123
[考研] 生物学学硕,初试351分,求调剂 +4 …~、王…~ 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:49 by limeifeng
[考研] 求调剂,现在还能填的 +3 上岸小莹加油 2026-04-08 3/150 2026-04-08 14:30 by zhq0425
信息提示
请填处理意见