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thunderay

铁杆木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】用HPLC荧光检测器遇到这种问题应该如何解决呢?

现在我做一个生物碱类的血浆样品分析,国内外文献报道的荧光检测器的激发波长都是220nm左右,发射波长是280nm左右,在这种低波长下,基线很容易不稳定,所以我的基线也比较不平,有很小的杂峰,光走流动相的时候,将波长改成300nm,500nm,发现基线就变得很好了,流动相尝试过水(乙酸铵)63:乙腈37,还有水(1%乙酸)63:乙腈37。。。发现都是这个样子。

希望大家能够提供一些建议,非常感谢。。

想把检测线做到10ng/ml左右,感觉好困难。。。100ng就比较困难了。。
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

★ ★ ★
thunderay(金币+3,VIP+0): 12-23 22:03
液相想做到ng级别有难度,楼主为什么需要这么高的检测限呢?
中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
2楼2009-12-23 12:46:48
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kele9955

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
thunderay(金币+3,VIP+0): 12-23 22:03
生物碱类?没有紫外吸收么?
我做过一个生物碱类的,紫外吸收很强,所以检测限可以很低...
昆嵛山的浪漫爱情传说,是今生你我的再次缠绵!
3楼2009-12-23 13:54:26
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thunderay

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by akosrios at 2009-12-23 12:46:
液相想做到ng级别有难度,楼主为什么需要这么高的检测限呢?

因为要做大鼠的血浆样品分析,所以要做到ng级。。
样品有荧光吸收的,不少文献报道也是用的荧光,是不是因为220到280的波长太短导致基线容易不平?发现跑很久也跑不平啊。。。
因为有相关参考文献(SCI)做到1ng/ml,但是我100ng做起来也很困难,主要是基线不平。。。波动在0.3-0.7LU之间。。。感觉实在太大了。。。
4楼2009-12-23 15:30:56
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