应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求职！有关原核表达，诱导不表达
51/1返回列表
查看: 686  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

chenstones

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求职！有关原核表达，诱导不表达

我最近在做原核表达。分别用了pQE-30和pET-28a载体，都用IPTG进行了诱导，但都没有表达。我的外源表达框sCAR-L测序正确，起始子和终止子也都加了，诱导温度和诱导时间都进行了摸索，但就是不表达，宿主细胞是跟载体对应，分别是M-15[pREP4]和BL21(DE3)。比较奇怪的是，我师姐用pQE-30为载体，表达出了sCAR-L-IL3,我比她的表达框更小，反而不表达，做了很多，摸索了很多，没有结果，很郁闷，希望各位虫友能帮帮忙，给点建议，非常感谢
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-12-22 23:15:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

x8q4h11

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by chenstones at 2009-12-22 23:15:
我最近在做原核表达。分别用了pQE-30和pET-28a载体，都用IPTG进行了诱导，但都没有表达。我的外源表达框sCAR-L测序正确，起始子和终止子也都加了，诱导温度和诱导时间都进行了摸索，但就是不表达，宿主细胞是跟载 ...

你好，能不能给我一管M15的甘油菌啊？qq364640134
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2009-12-23 13:57:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

plantst5928

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可能与你选取的基因片段有关系，我之前也是死活不表达，就改了一下片段长度就好了，你可以在缩短一些选取片段试试。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-12-22 23:49:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tianpingpe

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0): 12-23 12:20
1.你将你构建好的载体送去测序检测一下，看看有没有移码，阅读框是否正确。
2.你的酶如果可以测定活性的话，可以测定一下，还可以sds-page检测一下，也许表达了，表达量比较低，或者是包涵体。
3.你的是否包含了它自身的信号肽，有的时候信号肽也会影响表达
赞一下(21人) 回复此楼
3楼2009-12-23 10:07:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenstones

木虫 (小有名气)
★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 12-23 12:20
片段长度无法改变了啊，已经设计好了，改变了，就达不到预期表达蛋白的作用。除了考染，western bolting我也砸过，也没有表达，也不知道为什么。对于您说的包含了它自身的信号肽，这个我不太清楚，您能具体说一下吗？
赞一下(20人) 回复此楼
4楼2009-12-23 12:13:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:39 by 9i7PCSZyMzot
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:27 by 9i7PCSZyMzot
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:27 by 9i7PCSZyMzot
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:15 by 9i7PCSZyMzot
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:15 by 9i7PCSZyMzot
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:03 by 9i7PCSZyMzot
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 00:51 by 9i7PCSZyMzot
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 3/150 2026-09-20 00:15 by 9i7PCSZyMzot
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 3/150 2026-09-20 00:03 by 9i7PCSZyMzot
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-20 00:03 by 9i7PCSZyMzot
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:51 by 9i7PCSZyMzot
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:39 by 9i7PCSZyMzot
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:27 by 9i7PCSZyMzot
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:03 by 9i7PCSZyMzot
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:03 by 9i7PCSZyMzot
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-18 7/350 2026-09-19 21:03 by 9i7PCSZyMzot
[基金申请] 国社科系统bug了，是不是要放榜了？ +7 kynobel 2026-09-16 9/450 2026-09-19 14:52 by 接好运婷
[考博] 申博发邮件 +8 Lmengk 2026-09-15 9/450 2026-09-19 09:27 by 中间体超市
[有机交流] 各位大神，目前国内有哪些比较好用的逆合成软件？ 20+3 zapen 2026-09-15 9/450 2026-09-18 18:17 by zapen
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组｜2027级博士研究生招生公告 +7 水士口 2026-09-16 8/400 2026-09-16 13:47 by kkklens
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭