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chenstones木虫 (小有名气)
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[交流]
【求助/交流】求职!有关原核表达,诱导不表达
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| 我最近在做原核表达。分别用了pQE-30和pET-28a载体,都用IPTG进行了诱导,但都没有表达。我的外源表达框sCAR-L测序正确,起始子和终止子也都加了,诱导温度和诱导时间都进行了摸索,但就是不表达,宿主细胞是跟载体对应,分别是M-15[pREP4]和BL21(DE3)。比较奇怪的是,我师姐用pQE-30为载体,表达出了sCAR-L-IL3,我比她的表达框更小,反而不表达,做了很多,摸索了很多,没有结果,很郁闷,希望各位虫友能帮帮忙,给点建议,非常感谢 |
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