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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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刘仕博

金虫 (著名写手)

同意楼上的,呵呵~
生命在于折腾~
11楼2009-12-19 11:14:16
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peter9171


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引物序列是最重要的因素,其次是退火温度,引物量的增加不仅意义不大,过量的引物反而不好,容易形成引物二聚体,建议你重新设计一下引物
12楼2009-12-19 11:30:02
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

这样讲吧,通常引物用量不会有影响,但是如果引物量过低还是存在问题的,一般就是25ul体系,10uM的引物1ul足以。你所说的情况,增加了模版量有些就出带了,恐怕是模版浓度低的原因,可以试着再增加一点模版用量。如果模版很珍贵,就只能缩小反应体系来实验了,不要太小啊,太小不稳定因素太多,10ul的体系已经接近极限了
13楼2009-12-21 21:17:20
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yeyw04

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
根据扩增片段大小可以尝试延长扩增时间还有换换酶以及缓冲液!
14楼2009-12-25 12:41:52
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