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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】增加引物量有作用吗？
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刘仕博

金虫 (著名写手)
同意楼上的，呵呵~
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生命在于折腾~
11楼2009-12-19 11:14:16
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peter9171

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引物序列是最重要的因素，其次是退火温度，引物量的增加不仅意义不大，过量的引物反而不好，容易形成引物二聚体，建议你重新设计一下引物
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12楼2009-12-19 11:30:02
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
这样讲吧，通常引物用量不会有影响，但是如果引物量过低还是存在问题的，一般就是25ul体系，10uM的引物1ul足以。你所说的情况，增加了模版量有些就出带了，恐怕是模版浓度低的原因，可以试着再增加一点模版用量。如果模版很珍贵，就只能缩小反应体系来实验了，不要太小啊，太小不稳定因素太多，10ul的体系已经接近极限了
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13楼2009-12-21 21:17:20
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yeyw04

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
根据扩增片段大小可以尝试延长扩增时间还有换换酶以及缓冲液！
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14楼2009-12-25 12:41:52
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