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gdongli8325

铁杆木虫 (正式写手)

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虫号: 166431
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专业: 基因组学

[交流] 【求助/交流】增加引物量有作用吗？

PCR 结果一直不好。后来增加了模板量，有些样品扩增出来了，但有些还是没条带。现在感觉就剩增加引物这一个能改善的条件了。不知这个会不会有作用？因为模板不多了，所以不敢轻易尝试啊。在此向有经验的同学请教一下。

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1楼 2009-12-18 05:17:21

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

meigaofu

禁虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

本帖内容被屏蔽

9楼2009-12-18 18:22:12

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

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jlzkchong

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 851069
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专业: 生化与分子生物

★ ★ ★ ★ ★
1949stone(金币+4,VIP+0):谢谢 12-18 12:47
gdongli8325(金币+1,VIP+0): 12-18 15:44

引用回帖:

Originally posted by gdongli8325 at 2009-12-18 05:17:
PCR 结果一直不好。后来增加了模板量，有些样品扩增出来了，但有些还是没条带。现在感觉就剩增加引物这一个能改善的条件了。不知这个会不会有作用？因为模板不多了，所以不敢轻易尝试啊。在此向有经验的同学请教一 ...

不知道你的模板是什么？如果是质粒DNA的话，可以转化大肠杆菌，长出单菌落后挑斑摇菌，提质粒。增加引物量是没什么用的，扩增不到目的片段，估计只能是模板中所含你的目的片段量很少，你可以回收已经扩增出来的目的条带，用回收产物再做PCR