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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 【求助/交流】烟草叶片能不能压片进行荧光观察？
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longfeng

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】烟草叶片能不能压片进行荧光观察？

烟草叶片能不能压片进行荧光观察？
本人要进行亚细胞定位观测，软件预测的结果是在叶绿体中。
无法用洋葱表皮，打算用烟草做，但不知道怎样进行后期的处理，例如压片。哪位大侠能不能给想一个解决的办法?
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1楼 2009-12-16 19:43:25
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zanghecang

木虫 (正式写手)

清晴
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我是学烟草的，没有这么深入的研究过。
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实实在在做人，踏踏实实做事。
2楼2009-12-16 20:48:07
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michaelwuqingyu

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可以阿, 你用的是 eipifluorescnece 还是  laser confocal? 反正荧光都是反射光激发的， 不透光也无所谓，我曾经用过很小的叶片 （2周）来观察，没问题。你要生成转基因植株还是 transient expression tobacco cells?  看来是前者了，不过你要用一些 fluorescense marker来标记下叶绿体，然后让你的GFP （是GFP）吧 和maker colocalization才行 否则数据时没有说服力的。那些marker 可以在 Invitrogen 的 molecular probe 买

[ Last edited by michaelwuqingyu on 2009-12-17 at 06:05 ]
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3楼2009-12-17 06:03:10
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michaelwuqingyu

金虫 (正式写手)
或者你有个简单的办法，就是撕表皮细胞，不过叶片表皮细胞中没有叶绿体，只有叶肉细胞有 不过也可以用来做对照么 呵呵
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4楼2009-12-17 06:04:37
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longfeng

金虫 (小有名气)
谢谢各位大侠的解答。
我做的是瞬时转染，准备用基因枪轰击
用叶片撕表皮细胞能否达到要求？谢谢
有没有具体的试剂和步骤（撕表皮制片的）？
huawenping@126.com
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5楼2009-12-17 10:59:27
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michaelwuqingyu

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by longfeng at 2009-12-17 10:59:
谢谢各位大侠的解答。
我做的是瞬时转染，准备用基因枪轰击
用叶片撕表皮细胞能否达到要求？谢谢
有没有具体的试剂和步骤（撕表皮制片的）？
huawenping@126.com

你要注意的是 表皮细胞中没有叶绿体! 叶肉细胞才有.
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6楼2009-12-18 03:49:26
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
很简单啊，制备叶肉原生质体，烟草和拟南芥均可啊。
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7楼2010-01-12 17:34:33
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