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小小木虫8580

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于定量(real-time)PCR的标准曲线制作

本人想做某一个基因的在某一环境条件下的mRNA的绝对拷贝数。
目前还不清楚这个标准曲线该如何去做。
自己的思路是把该标准基因转到质粒中,然后摇菌,抽质粒,分光光度法测定质粒DNA浓度,根际质粒DNA的分子量换算成摩尔数,然后再梯度稀释后,做荧光定量PCR的标准曲线。自己觉得可行,但是感觉好麻烦。
不知道有没有更加简便的方法。查文献的话一般不会给出标准曲线的做法,可能太简单了吧。有没有人能给个好的意见,谢谢!
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小小木虫8580

金虫 (小有名气)

没有人知道吗???
2楼2009-12-16 14:04:35
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叔扬

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能大家还没有理解你的意思。
你提问怎样做标准曲线,下面你又回答了用“荧光定量PCR”做标准曲线。标准曲线难道不是用荧光定量PCR仪自动完成的吗?
小子无识
3楼2010-01-07 10:55:13
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
以质粒为模板的是最稳定的,就是用你说的方法做
当然了,还有买标准品,但其实并不需要
4楼2010-01-07 12:46:12
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