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【求助/交流】关于定量(real-time)PCR的标准曲线制作
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本人想做某一个基因的在某一环境条件下的mRNA的绝对拷贝数。 目前还不清楚这个标准曲线该如何去做。 自己的思路是把该标准基因转到质粒中,然后摇菌,抽质粒,分光光度法测定质粒DNA浓度,根际质粒DNA的分子量换算成摩尔数,然后再梯度稀释后,做荧光定量PCR的标准曲线。自己觉得可行,但是感觉好麻烦。 不知道有没有更加简便的方法。查文献的话一般不会给出标准曲线的做法,可能太简单了吧。有没有人能给个好的意见,谢谢! |
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没有人知道吗???