24小时热门版块排行榜    

查看: 736  |  回复: 11
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yf-deng

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】6碱基的低频内切酶和4碱基高频内切酶酶切条件之差异?

要疯了,做AFLP选则6碱基的低频内切酶(HindIII-A/AGCTT,EcoRI-GAATT/C,PstI-CTGCA/G)老是切不动(至少无明显的酶切迹象),
而4碱基的高频内切酶(TaqI-T/CGA,MseI-T/TAA)则能切的很好,不知道大家有何高见?难道是6碱基低频内切酶对DNA的质量要求非常高(杂质污染要求高)?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yf-deng

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2009-12-21 21:27:
一位网上的战友遇到的问题和你一样,我做过很长时间的AFLP,但是从没有将其中每个酶进行单独酶切,在我看来,实际情况可能是酶切的结果就是这样,因为那位战友没有解决这个问题,后来AFLP做出来了,所以建议你检测 ...

谢谢!请问您做AFLP是用什么酶切组合?还有您连接的时候一定量的体系分别用了多少接头?还有就是您在做预扩的时候两种预扩引物是否用的等量(因为我在做预扩的时候老是出现一条特异性的带)?如果不是,是怎样一个比值呢?谢谢!
9楼2009-12-21 22:19:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

yf-deng

金虫 (正式写手)

这是另一个酶切结果
2楼2009-12-16 09:21:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pal2004

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
对呀,你的DNA很可能完整度不好。
3楼2009-12-16 09:53:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yf-deng

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by pal2004 at 2009-12-16 09:53:
对呀,你的DNA很可能完整度不好。

何以见得呢?谢谢您的回复!
4楼2009-12-16 10:31:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见