应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】定量PCR
81/1返回列表
查看: 490  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

leon198418029

金虫 (小有名气)

research associate

[交流] 【求助/交流】定量PCR

第一次做定量，就是试试用已知浓度的样品的做条标准曲线。把原始浓度的做了5个梯度稀释，但是没有平行样，所以加上空白对照一共7个样。用SYBR法，可惜忘了做熔解（即DISSOCIATION PROTOCOL）。。。所以最后的图中没有熔解曲线。但是连标准曲线都没有，为什么？我当时把前6个样都设成STANDARD了呀。求高人指导！急！多谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
不忘初心，为梦远行。
1楼 2009-12-15 17:23:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuhui1108

木虫 (正式写手)

小害虫
啊顶,专家来指导啊!!
赞一下 回复此楼
小害虫
2楼2009-12-17 18:01:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小虫之老虫

新虫 (小有名气)
也想了解
帮顶
回复此楼
3楼2009-12-17 22:41:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leon198418029

金虫 (小有名气)

research associate
引用回帖:
Originally posted by fuhui1108 at 2009-12-17 18:01:
啊顶,专家来指导啊!!

我知道怎么做了，在开始PCR之前的一步，即决定样品是unknown,standard,NTC的那步，在选项栏里有一个quantity的选项，选定标准样品编号后，可以在里面输入DNA样品的数量或浓度，然后把所有标准样品的这个选项都写好，再进入下一步PCR步骤，当结束后，就可以看到标准曲线了
PS：如果是SYBR法，千万别忘了在PCR步骤后添加association protocol，或者在开始时选dissociation而不是absolute，否则没有溶解曲线就白搭了哦
赞一下 回复此楼
不忘初心，为梦远行。
4楼2009-12-18 08:53:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leon198418029

金虫 (小有名气)

research associate
引用回帖:
Originally posted by 小虫之老虫 at 2009-12-17 22:41:
也想了解
帮顶

我知道怎么做了，在开始PCR之前的一步，即决定样品是unknown,standard,NTC的那步，在选项栏里有一个quantity的选项，选定标准样品编号后，可以在里面输入DNA样品的数量或浓度，然后把所有标准样品的这个选项都写好，再进入下一步PCR步骤，当结束后，就可以看到标准曲线了
PS：如果是SYBR法，千万别忘了在PCR步骤后添加association protocol，或者在开始时选dissociation而不是absolute，否则没有溶解曲线就白搭了哦
赞一下 回复此楼
不忘初心，为梦远行。
5楼2009-12-18 08:54:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leon198418029

金虫 (小有名气)

research associate
我用的仪器是ABI公司的7500，不知楼上二位的仪器是什么，希望能有所帮助。
赞一下 回复此楼
不忘初心，为梦远行。
6楼2009-12-18 08:56:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

boouy

银虫 (正式写手)
需要输入模板量参数。
赞一下 回复此楼
7楼2009-12-18 12:01:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙中清泉

木虫 (正式写手)
学习了，谢谢
回复此楼
8楼2009-12-18 12:46:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 leon198418029 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学工程调剂289 +44 yang婷 2026-04-07 50/2500 2026-04-12 02:36 by 秋豆菜芽
[考研] 327求调剂 +5 拾光任染 2026-04-06 5/250 2026-04-12 02:29 by 秋豆菜芽
[考研] 085410 273求调剂 +9 X1999 2026-04-09 9/450 2026-04-12 00:46 by 丛麟ll
[考研] 332求调剂 +14 蕉蕉123 2026-04-10 14/700 2026-04-12 00:27 by 蓝云思雨
[考研] 331求调剂 +5 王国帅 2026-04-11 5/250 2026-04-11 22:56 by 溪涧流水
[考研] 291分调剂 +5 上岸小莹加油 2026-04-09 6/300 2026-04-11 21:06 by 逆水乘风
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +18 ioodiiij 2026-04-08 18/900 2026-04-11 20:25 by liyun12321
[考研] 生物学调剂 +8 小冉要努力 2026-04-10 9/450 2026-04-11 10:22 by wwj2530616
[考研] 22408 352分求调剂0854类 +4 努力的夏末 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:57 by zhq0425
[考博] 博士自荐 +7 可可小胖 2026-04-08 7/350 2026-04-10 08:28 by kimhero
[考研] 297求调剂 +27 GENJIOW 2026-04-07 30/1500 2026-04-09 23:20 by wolf97
[考研] 材料化工总分334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 20:19 by maddjdld
[考研] 求调剂希望还是希望在山河四省附近 +3 快乐的小白鸽 2026-04-05 3/150 2026-04-09 17:36 by wp06
[考研] 求调剂材料科学与工程一志愿985初试365分 +5 材化李可 2026-04-08 5/250 2026-04-09 17:00 by Lilly_Li
[论文投稿] 求助文献原文 10+3 18500821399 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:56 by 北京莱茵润色
[考研] 电子信息346 +4 zuoshaodian 2026-04-08 4/200 2026-04-08 11:54 by zzucheup
[考研] 机械调剂 +3 zzzbcb 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:19 by hemengdong
[考研] （调剂）一志愿报考哈尔滨工业大学0857资源与环境专业378分考生 +7 狠狠加油 2026-04-05 8/400 2026-04-06 16:52 by momo皓
[考研] 377求调剂 +6 by.ovo 2026-04-05 6/300 2026-04-05 22:18 by dongzh2009
[考研] 求调剂 +7 张.1 2026-04-05 7/350 2026-04-05 20:40 by 啵啵啵0119
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭