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青青草hwj

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】急啊,PCR

各位好,Marker右边两个的基因组影响PCR效果么?是植物的
非常感谢啊,p不出来啊
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青青草hwj

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 青青草hwj at 2009-12-14 19:35:
各位好,Marker右边两个的基因组影响PCR效果么?是植物的
非常感谢啊,p不出来啊

谢谢!那其他酶等的加的量和平时差不多么?引物7.5UM大概加多少?10um dNTP呢?20ul的反应体系,谢谢啦,那两个对结果影响大么?我做了不少改变那两个的都没有反应
非常感谢
7楼2009-12-15 08:51:32
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查看全部 12 个回答

caocaomu

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+2,VIP+0):谢谢 12-14 20:36
Maker右边的12跟34浓度差不多,也都有RNA没除,如果一点都括不出来的话试试不同的模板浓度,把母液吸出2UL,加18UL水,然后在PCR时分别以1,3,5,7UL做不同的浓度梯度看看能否括得出来。
2楼2009-12-14 20:24:29
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xyls6868

新虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by caocaomu at 2009-12-14 20:24:
Maker右边的12跟34浓度差不多,也都有RNA没除,如果一点都括不出来的话试试不同的模板浓度,把母液吸出2UL,加18UL水,然后在PCR时分别以1,3,5,7UL做不同的浓度梯度看看能否括得出来。

这意思是说模板的浓度有问题吗?
3楼2009-12-14 20:30:27
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won7

金虫 (小有名气)

你的模板问题不大,按caocaomu  的建议在做PCR时做模板梯度,如果出不来,那检查的的PCR试剂和引物是否有问题。
4楼2009-12-14 22:23:39
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