应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】蛋白体外表达蛋白PAGE胶看不到
51/1返回列表
查看: 363  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zhoum1322

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】蛋白体外表达蛋白PAGE胶看不到

请教一下蛋白体外表达的问题。我用的是Promega公司的TNT® T7 Quick for PCR DNA 体外表达，引物设计的没有问题。
但是为什么跑PAGE胶看不到目的带？

是蛋白的表达量太少还是其他的原因.

另外蛋白体系中红红 的东西。很影响表达蛋白的 检测，如何去除啊
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-12-14 15:49:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

忘记将来

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
没有东东呀，是不是反应体系有问题，或者试剂放得太久了，
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2009-12-14 16:43:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

tianpingpe

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+2,VIP+0):谢谢 12-14 16:44
最好发个图看看，你的marker正常吗？条带和亮度等都正常吗，你电泳的是全细胞还是破碎的上清？你能确定你的蛋白表达了吗？
赞一下(11人) 回复此楼
2楼2009-12-14 15:54:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhoum1322

新虫 (初入文坛)
★ ★
1949stone(金币+2,VIP+0):欢迎发图 12-14 16:45
引用回帖:
Originally posted by tianpingpe at 2009-12-14 15:54:
最好发个图看看，你的marker正常吗？条带和亮度等都正常吗，你电泳的是全细胞还是破碎的上清？你能确定你的蛋白表达了吗？

我采用的是Promega公司的TNT® T7 Quick for PCR DNA 无细胞表达系统。

一团红红的试剂，把PCR出的模板扔进去就可以出蛋白的那种。
左边的是加了PCR模板的，右边的是没有加PCR模板的对照

[ Last edited by zhoum1322 on 2009-12-14 at 16:01 ]
赞一下(10人) 回复此楼
3楼2009-12-14 16:00:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冬虫夏草1

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
首先考虑一下你的胶：Arc与Bis的比例，因为浓缩效应对分离影响很大。
赞一下(1人) 回复此楼
倚楼听风雨，淡看江湖路！
5楼2009-12-14 17:00:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂一志愿海大，0703化学学硕304分，有大创项目，四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 求调剂 +6 十三加油 2026-03-21 6/300 2026-03-22 17:00 by i_cooler
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +6 2117205181 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:59 by allen-yin
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 考研调剂 +4 来好运来来来 2026-03-21 4/200 2026-03-22 12:15 by 星空星月
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 278求调剂 +9 烟火先于春 2026-03-17 9/450 2026-03-21 17:47 by 学员8dgXkO
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +6 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-21 17:21 by 学员8dgXkO
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 316求调剂 +6 梁茜雯 2026-03-19 6/300 2026-03-21 06:32 by Ecowxq666！
[考研] 一志愿中国石油大学（华东） 本科齐鲁工业大学 +3 石能伟 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:22 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华南师大 070300（化学）304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
[考研] 11408 一志愿西电，277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭