24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 396  |  回复: 4
当前主题已经存档。

zhoum1322

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】蛋白体外表达蛋白PAGE胶看不到

请教一下蛋白体外表达的问题。我用的是Promega公司的TNT® T7 Quick for PCR DNA 体外表达,引物设计的没有问题。
但是为什么跑PAGE胶看不到目的带?

是蛋白的表达量太少还是其他的原因.

另外蛋白体系中红红 的东西。很影响表达蛋白的 检测,如何去除啊
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tianpingpe

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+2,VIP+0):谢谢 12-14 16:44
最好发个图看看,你的marker正常吗?条带和亮度等都正常吗,你电泳的是全细胞还是破碎的上清?你能确定你的蛋白表达了吗?
2楼2009-12-14 15:54:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhoum1322

新虫 (初入文坛)

★ ★
1949stone(金币+2,VIP+0):欢迎发图 12-14 16:45
引用回帖:
Originally posted by tianpingpe at 2009-12-14 15:54:
最好发个图看看,你的marker正常吗?条带和亮度等都正常吗,你电泳的是全细胞还是破碎的上清?你能确定你的蛋白表达了吗?

我采用的是Promega公司的TNT® T7 Quick for PCR DNA 无细胞表达系统。

一团红红的试剂,把PCR出的模板扔进去就可以出蛋白的那种。
左边的是加了PCR模板的,右边的是没有加PCR模板的对照

[ Last edited by zhoum1322 on 2009-12-14 at 16:01 ]
3楼2009-12-14 16:00:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

忘记将来

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
没有东东呀,是不是反应体系有问题,或者试剂放得太久了,
4楼2009-12-14 16:43:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冬虫夏草1

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
首先考虑一下你的胶:Arc与Bis的比例,因为浓缩效应对分离影响很大。
倚楼听风雨,淡看江湖路!
5楼2009-12-14 17:00:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhoum1322 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 271求调剂 +29 2261744733 2026-04-11 29/1450 2026-04-14 16:48 by zhouxiaoyu
[考研] 生物学调剂 +7 纸扇zhishan 2026-04-13 7/350 2026-04-14 14:21 by jyl0317
[考研] 调剂求收留 +32 果然有我 2026-04-10 33/1650 2026-04-14 08:49 by 木木mumu~
[考研] 300分求调剂 (085501机械专硕,本科扬大) +9 xu@841019 2026-04-11 10/500 2026-04-14 08:48 by 木木mumu~
[考研] 0856专硕求调剂 希望是a区院校 +24 好好休息好不好 2026-04-09 27/1350 2026-04-13 22:22 by pies112
[考研] 材料考研调剂 +29 云木达达 2026-04-11 31/1550 2026-04-13 13:32 by lyh鲁老师
[考研] 0854调剂 +10 长弓傲 2026-04-11 11/550 2026-04-13 10:38 by wp06
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-09 12/600 2026-04-12 10:32 by 逆水乘风
[考研] 材料工程日语考生求调剂 +7 0856?调剂 2026-04-10 7/350 2026-04-11 21:33 by 蓝云思雨
[考研] 270求调剂 +14 杨乐369 2026-04-11 14/700 2026-04-11 20:16 by 蓝云思雨
[考研] 085400 328分 求调剂 +10 喂你一个大橙子 2026-04-09 14/700 2026-04-11 19:53 by lqspecial
[考研] 352 求调剂 +6 yzion 2026-04-11 8/400 2026-04-11 16:24 by 明月此时有
[考研] 296求调剂 +6 汪!?! 2026-04-09 6/300 2026-04-11 11:25 by zhq0425
[考研] 中药学调剂 初试324 +4 洋甘菊、 2026-04-10 6/300 2026-04-11 09:41 by gong120082
[考研] 337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 08:57 by zhq0425
[考研] 调剂 +12 卷卷卷心菜_ 2026-04-09 13/650 2026-04-10 22:36 by Ftglcn90
[考研] 本科西工大 0856 324求调剂 +10 wysyjs25 2026-04-09 11/550 2026-04-10 08:37 by 5268321
[考研] 348求调剂 +3 candyyyi 2026-04-09 3/150 2026-04-09 17:20 by 段伟艳
[考研] 286求调剂 +19 Faune 2026-04-08 20/1000 2026-04-09 08:36 by 哦哦123
[考研] 263分B区求调剂 +6 李nihao 2026-04-08 6/300 2026-04-08 09:38 by 南开小綦
信息提示
请填处理意见