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阿龙6678

银虫 (初入文坛)

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专业: 固体无机化学

[交流] 【求助】怎样测试纳米复合材料的生物可溶性和毒性

请问各位大侠怎样测试纳米复合材料的生物可溶性和毒性呢？
我在做一个proposal，其中要用到Si QDs 被包裹在 phospholipids 中，怎样测试这个体系的生物可溶性和毒性呢？
能不能讲一下具体的实验操作方法和相关的文献呢？
如果可以的话最好有实验材料，设备，操作步骤，和表征方法。
多谢大侠们啊！！

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1楼2009-12-14 01:37:09

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jing15209791

金虫 (正式写手)

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专业: 电化学分析

★ ★
薰衣草儿(金币+2,VIP+0):欢迎讨论~ 1-7 10:02

参考本版资源里：
四唑盐（MTT）比色法
操作步骤
接种细胞
（1）用胰蛋白酶消化汇合的单层细胞，将细胞收集到含血清的培养基中。
（2）离心细胞悬液,使细胞沉积下来。用培养基重悬细胞，计数。
（3）将细胞稀释至2.5×103-50×103 个/ml,每个微滴定板可容纳20ml细胞重悬液。
（4）用加样器在平底96孔板中间十列的各孔中加入200μl细胞悬液，每孔加0.5×103-10×103 个细胞。
（5）将200μl培养基加至第1列和第12列的8个孔中。第1列作读板议的空白对照。
（6）将培养板放至塑料饭盒中，于37℃湿润环境中温育1-3天，等细胞进入指数生长期时可加入药物。
添加药物
（7）用培养基将细胞毒性药物5倍系列稀释，共制备8个浓度。
（8）对于贴壁生长的细胞，去除第2-11列各孔的培养基。
（9）在第2列和第11列的8个孔中加入200μl新鲜配制的培养基，这些细胞作为对照。
（10）在第3-10列的细胞中加入细胞毒性药物。每个药物浓度仅需4个孔，这样A-D行可用于第一种药物，E-H行用于第二种药物。
（11）向每组4 孔中各加入200μl药物溶液。
（12）将培养板放回塑料盒中，温育至确定时间。
生长期
（13）在药物作用期结束时，去除所有含有细胞的孔中的培养基，加入200μl新鲜的培养基。
（14）每日换液至2-3个PDTs[群体倍增时间]。
存活细胞数的估算
（15）在生长期末，每孔中各加入200μl新鲜的培养基，在第1-11列所有孔中各加入50μl MTT。
（16）用铝箔包裹培养板，于37℃湿润环境中温育4 h。
（17）弃去孔中的培养基和MTT，在第1-11列所有孔中各加入200μl DMSO，以溶解残留的MTT-甲臜结晶。
（18）在含有DMSO的各孔中加入甘氨酸缓冲液（每孔25μl）。
（19）立即在570nm处记录吸光值。读板仪用第1 列中含培养基和MTT但不含细胞的各孔调零。
分析
以药物浓度为横坐标（X轴），吸光值为纵坐标（Y轴）绘制曲线图。第2列和第11列各孔中得出的平均吸光值作为对照吸光值，对照组吸光值减少一半时所需的药物浓度为IC50 浓度。