| 查看: 2652 | 回复: 13 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
richenim金虫 (小有名气)
|
[交流]
【求助】细胞凋亡形态学观察 细胞爬片 已有6人参与
|
||
|
我最近在做细胞形体学染色观察，可是出现了些问题哦。希望高手能帮忙解决下哦 我是这样操作的： 1，将玻片置于六孔板，接种细胞 2，给药，24h后洗尽培养基，PBS洗2遍，加入2ml 3.7% 多聚甲醛固 定10min 3，弃去固定液，PBS洗3遍，每次3min，洗尽液体 4，加入1ml（10微克/ml）hoechest33342，37度培养15min PS: hoechest33342是用蒸馏水先配成1mg/ml，再用PBS稀释成10微克/ml后加入的。 有很多问题出现了：首先第一步中，接种细胞16小时后细胞在玻片上的贴壁效果不好，很多还是漂浮着。而且玻片下面不知怎么出现很多气泡，是不是我细胞爬片没做好，还是接种的细胞密度太大，还是其他什么原因。 第二步中，细胞固定10min后用PBS洗涤后感觉细胞没有完全固定，还是有漂浮的，不知道是不是固定的时间短了。最后加荧光染料，染色15min后，荧光显微镜观察荧光的强度很弱，我在想加入荧光染料染色后需不需要将液体弃去再观察？ 我的操作步骤有没有问题啊？ 做细胞凋亡形态学观察可不可以不用做细胞爬片，直接在板里接种，给药，荧光染料染色后观察啊？ |
回复此楼» 猜你喜欢
国自然面上和省基金B类撒花
已经有9人回复
-
华师大读博
已经有5人回复
-
又一批高校组建人工智能学院 师资行吗 不是骗人吗
已经有5人回复
-
急需审稿人！！！
已经有3人回复
-
申博/考博
已经有8人回复
-
295分求调剂
已经有6人回复
-
一志愿中科大材料与化工，353分还有调剂学校吗
已经有13人回复
-
085600材料与化工调剂
已经有6人回复
-
有没有接收比较快的sci期刊呀，最好在一个月之内的，研三孩子求毕业
已经有7人回复
-
337求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求救啊！请高手诊断病因所在，关乎实验生死.（免疫荧光技术）
已经有7人回复
- 新买的盖玻片怎么处理
已经有16人回复
- 求有关细胞凋亡的形态学观察方法
已经有7人回复
- 细胞爬片后，能做HE染色吗？
已经有3人回复
- 【求助】单细胞如何做免疫组化
已经有6人回复
- 【求助】关于苦味酸饱和溶液的配制
已经有9人回复
- 【求助/交流】激光共聚焦显微镜显微镜
已经有6人回复
- 【讨论】F-actin 染色中为什么染不出纤维状图片
已经有7人回复
- 【分享】细胞爬片全过程经验总结
已经有27人回复
- 【求助】做过细胞毒性实验的请进
已经有6人回复
richenim
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1319.1
- 散金: 44
- 红花: 1
- 帖子: 203
- 在线: 45.5小时
- 虫号: 644966
- 注册: 2008-11-03
- 性别: MM
- 专业: 免疫学研究新技术与新方法
3楼2009-12-13 17:41:47
2楼2009-12-13 17:06:02
richenim
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1319.1
- 散金: 44
- 红花: 1
- 帖子: 203
- 在线: 45.5小时
- 虫号: 644966
- 注册: 2008-11-03
- 性别: MM
- 专业: 免疫学研究新技术与新方法
4楼2009-12-16 21:43:13
xiaopangqd
银虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 285
- 散金: 56
- 红花: 1
- 帖子: 672
- 在线: 165.4小时
- 虫号: 827134
- 注册: 2009-08-13
- 性别: MM
- 专业: 神经精神药物药理
5楼2009-12-20 11:33:16
5