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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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阿龙6678

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】GFP的表达

刚刚接触GFP，想问些很基础的问题：

GFP tag-plasmid 表达以后 GFP哪里去了呢？ GFP是蛋白，不是基因，表达的时候会发生什么变化？表达以后的蛋白质里还会含有GFP吗？用GFP标记质粒然后观察重组基因是否被表达为重组蛋白的具体原理是什么呢？

多谢各位大侠帮助啊！！！
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1楼 2009-12-12 14:04:25
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qingbo62

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
阿龙6678(金币+2):谢谢参与
薰衣草儿(金币+2,VIP+0):虫子懂得真多，再奖 12-12 20:54
问错版面了，这个属于生物技术，分子克隆的基础知识。
Tag是指一个标签，利用基因重组技术将GFP的基因转入克隆载体（启动子调控下），通过转化、复制等到过程，构建一个含GFP片断的质粒。
它的作用：通俗的说，可以作为一个报告基因，就是最普通的DNA转染。另一种情况，你要检测一个不易检测的蛋白，可以通过GFP的表达量来间接定量该蛋白。

不知道这么说可明白？
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2楼2009-12-12 15:00:40
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qingbo62

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
yusen_1982(金币+2,VIP+0):欢迎讨论！！！！ 12-12 16:02
阿龙6678(金币+2,VIP+0):谢谢！！：） 12-13 01:05
引用回帖:
Originally posted by 阿龙6678 at 2009-12-12 14:04:
刚刚接触GFP，想问些很基础的问题：

GFP tag-plasmid 表达以后 GFP哪里去了呢？ GFP是蛋白，不是基因，表达的时候会发生什么变化？表达以后的蛋白质里还会含有GFP吗？用GFP标记质粒然后观察重组基因是否被表达 ...

并不是你理解的用GFP标记这个质粒，而是说这个质粒被插入了表达GFP的一段基因。
蛋白是通过基因编码表达的。所以有时候二者是一个意思。
比如说PCR和western，虽然一个是基因一个是蛋白水平，但是二者很多情况下就用同一个名称表示，比较方便。
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3楼2009-12-12 15:05:06
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阿龙6678

银虫 (初入文坛)
多谢！！那如果说重组蛋白是Cys-tagged，也就是说在重组基因中加入了表达Cys的基因段是吗？
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4楼2009-12-13 01:05:13
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tianya8i

至尊木虫 (文坛精英)
★ ★
阿龙6678(金币+2):谢谢参与
薰衣草儿(金币+1,VIP+0):欢迎交流~ 1-6 13:22
生物技术，分子克隆的基础知识
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5楼2009-12-13 18:14:59
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qingbo62

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
薰衣草儿(金币+1,VIP+0):欢迎交流~ 1-6 13:22
阿龙6678(金币+2,VIP+0):多谢！ 1-11 06:41
引用回帖:
Originally posted by 阿龙6678 at 2009-12-13 01:05:
多谢！！那如果说重组蛋白是Cys-tagged，也就是说在重组基因中加入了表达Cys的基因段是吗？

是这样子的，其实表达的是一个融合蛋白。
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6楼2010-01-06 10:49:30
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edward12101759

金虫 (正式写手)
★ ★
阿龙6678(金币+2):谢谢参与
薰衣草儿(金币+1,VIP+0):欢迎交流~ 1-6 13:22
楼主问的是绿色荧光蛋白吗？
要是绿色荧光蛋白标记我做过植物细胞的，
就是表达之后在植物细胞内有GFP，然后荧光显微镜看到绿色的就是转导成功的。
如果不是的话就不太明白了..
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7楼2010-01-06 11:22:08
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