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fanhuijia

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】菌悬液溶度

我在做大肠杆菌,需制成菌悬液,让其溶度达到10的9次方。请问斜面洗脱的时候要注意什么,才能将大部分细菌洗下来?因为我已经洗脱过,就是直接用生理盐水倒试管里晃晃再倒出来,没达到我要的量~如果我用液体培养基培养成菌悬液,能直接给大鼠腹腔注射吗?
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honglix

银虫 (正式写手)


1949stone(金币+1,VIP+0):谢谢交流 12-11 20:54
用甘油加LB培养液
2楼2009-12-11 15:26:45
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qiang84zhang

银虫 (正式写手)

不行吧,还要加佐剂!
3楼2009-12-11 17:14:45
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pamela9838

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+2,VIP+0):谢谢交流 12-11 20:55
可以用接种环或者接种针在你的斜面上刮一下,觉得液体培养的菌先洗一下,再用缓冲液悬浮再注射会好些,不过我没做过

[ Last edited by pamela9838 on 2009-12-11 at 20:52 ]
4楼2009-12-11 20:50:01
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随游

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
先在斜面中加水,再用接种铲刮斜面(或是轻轻拍打,不刮破培养基就可以),将大的菌丝去除,剩下的悬液即可
我做霉菌培养转接到液体培养基是这么操作的
5楼2009-12-13 11:52:59
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xingrl

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
斜面培养一般是做菌种保种培养用,如果需要一定密度的话,一般再菌悬液培养达到需要的密度

[ Last edited by xingrl on 2009-12-13 at 14:01 ]
6楼2009-12-13 12:28:37
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changsijin

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用移液枪吸灭菌的生理盐水反复冲洗斜面就能洗下来,我是这样操作的
7楼2009-12-13 13:30:21
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
将大肠杆菌稀释后涂布LA平板,37度倒置培养一天后达到生理最佳时期,在平板上加少量生理盐水,用三角涂布棒轻轻刮掉,浓度自己控制,达到九次方10次方都没问题。要注意的就是LA的琼脂加多点使得平板硬一点,免得毛手毛脚的刮破平板;稀释梯度不能太稀,使得一块平板一天后有小部分菌落长成菌苔,但是菌落间很相近;生理盐水不加太多免得稀释过大,宁可太浓可以稀释。

楼主发完帖应该上来看看回帖。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
8楼2009-12-13 13:32:54
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杨大妞

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
在平板上加少许生理盐水,加的量自己计算,用接种环轻轻刮下便可
9楼2009-12-13 13:37:50
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fanhuijia

铜虫 (初入文坛)

谢谢大家,我每天都有来看的哦~
我不是这个专业的,你们说的平板培养我没做过。我现在改用灌胃,所以用液体培养溶度就差不多,但是还出来我想要的结果~郁闷呢~
10楼2009-12-14 14:26:16
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