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yzuxhq368

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR

用引物扩增出某基因片,然后插入抗性基因,转化感受态,提质粒,酶切鉴定正确,但用原引物却无法扩增出该含抗性基因的片段,请教高手。
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liyong1981

金虫 (正式写手)



yzuxhq368(金币+1):谢谢参与
楼主这样的做法,是偶感到匪夷所思,一般来说,我们用得质粒载体都有抗性片段的,你外源基因的插入MCS中,可以扩出来 你把抗性片段插入到你的目的基因里面,是什么用呢????这啥技术?目的是什么?目的片段插入抗性?突变?失活?
6楼2009-12-11 13:12:20
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ln0401

新虫 (初入文坛)

★ ★
yzuxhq368(金币+1):谢谢参与
yzuxhq368(金币+1,VIP+0): 12-11 22:35
这个问题还没遇见过,我以前做的PCR检测结果是对的,但酶切鉴定做不出来。
2楼2009-12-11 09:56:00
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walker2898

银虫 (小有名气)

★ ★
yzuxhq368(金币+1):谢谢参与
yzuxhq368(金币+1,VIP+0): 12-11 22:35
我觉得你的抗性基因是插入的,应该原引物无法扩增出该含抗性基因。
3楼2009-12-11 10:02:54
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bioxixi

木虫 (著名写手)

★ ★
yzuxhq368(金币+1):谢谢参与
yzuxhq368(金币+1,VIP+0): 12-11 22:35
插入抗性基因 是什么意思
你想用原引物扩出来,得保证该抗性基因在两引物之间,也就是你把抗性基因插入到PCR片段中了?
5楼2009-12-11 12:42:04
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