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[交流]
his标签如何切去？
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| 蛋白上有his标签，想把它切去(买了sigma的凝血酶（T4648），粉末).具体在实验的时候该怎么操作呢？比如说，蛋白在NI柱上的时候切吗？该用怎样的酶切体系？时间、温度、pH？希望有经验的虫虫不吝赐教！ |
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qingfengwu
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tancf(金币+3,VIP+0):好像不是我要的答案，不过仍然感谢！ 12-12 09:55
tancf(金币+3,VIP+0):好像不是我要的答案，不过仍然感谢！ 12-12 09:55
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Ni Sepharose High Performance 用于高分辨率纯化的预带电荷的介质Ni Sepharose High Performance，通过耦联Ni使介质预带电荷，使用非常方便。和其它厂家的同类产品比较，它具有高载量和低的Ni脱落的特点，低的镍脱落保证的HIS-标记的蛋白质在多次重复的纯化中保持可靠的载量。同时Ni Sepharose High Performance填料的颗粒大小只有34um，具备最高的分辨率和最低的样品稀释。Ni Sepharose High Performance除了有散装填料形式， 也具有HISTrap1Ml和5Ml的实验室预装柱,可以连接AKTA仪器，蠕动本以及手动注射器操作,使用非常方便。 His MultiTrap HP 96孔过滤板 用于高通量筛选和多样品的平行纯化，预装了Ni Sepharose High Performance的填料，未澄清的细胞裂解液可以直接上样，具有高重复性，操作简单方便快捷的特点。 His SpinTrap柱 用于少量的蛋白质制备，预装了100ul的HP填料，可以直接上澄清和未澄清的样品，可用于细菌细胞裂解液的筛选和优化纯化条件，与标准离心机使用，一次纯化仅需10分钟。 Ni Sepharose6 Fast Flow 高度交联的琼脂糖的高流速性质，使其成为批次纯化,蛋白制备和放大生产的首选介质。Ni Sepharose6 Fast Flow填料具有非常高的载量，意味着纯化同样的蛋白所用的介质就更少，成本就更低。 和其它厂家的同类产品比较，它具有高载量和低的Ni脱落的特点,低的镍脱落保证的His-标记的蛋白质在多次重复的纯化中保持可靠的载量。同样具有高载量和低的Ni脱落的特点。同样有HisTrap FF预装柱和His MultiTrap FF96孔板的形式,方便不同目的的纯化。 His Trap FF crude预装柱 从未澄清的细胞裂解液中直接纯化目标蛋白质。HisTrap FF crude 1 ml和5 ml内预装了Ni Sepharose 6 FF，可以直接上样未澄清的细胞裂解液，这样减少样品制备时间，加快纯化速度，使在有蛋白酶存在的细胞裂解液中敏感的目标蛋白质的降解可能性降到降到最小。 His GraviTrap 简单的纯化和快速得到结果 His GraviTrap是预装了Ni Sepharose 6 FF一次性使用的柱子。柱子可以用重力不需要系统快速简单的纯化，澄清的和未澄清的大体积的样品可以一次性上样，一次纯化的时间大约在30分钟(根据样品的体积和黏度) HisGraviTrap包含在HisGraviTrap的Kit中，其中包含了优化过的，可供20次纯化使用的缓冲液。 His Buffer Kit——方便添加的预制好的缓冲液Kit含有结合、清洗和洗脱的浓缩缓冲液，适合于Ni Sepharose和IMAC Sepharose产品，节省了耗时的缓冲液配置时间,加快纯化目标蛋白质 |
7楼2009-12-04 13:48:31
lzhwin
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2楼2009-12-04 10:05:30
3楼2009-12-04 10:33:59
dyyyyy
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4楼2009-12-04 10:58:41
5