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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 有用过taq mix的吗？求助
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cuican371

新虫 (初入文坛)

[交流] 有用过taq mix的吗？求助

这个东西是不需要调整酶及镁离子浓度的，只需要调整模板、引物和水，那会不会因为不能调整而造成pcr条件摸索不出来？不太懂，请指教
还有如果没问题的话，哪里出的mix用着比较好？
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1楼 2009-12-01 22:47:55
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mever

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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司马诸葛(金币+2,VIP+0): 12-2 08:23
看楼主做哪种类型的PCR了
如果是ISSR这种对镁离子十分敏感的 就不能用mixture 要用Mg free的
如果不是 关键就是你引物的特异性 以及模板的纯度及质量高低了
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2楼2009-12-02 07:41:33
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cuican371

新虫 (初入文坛)
我做的正是ISSR,那就是说我只能单一加入每种试剂，然后慢慢调整各项比例了？
有mg free的mix？？谢谢楼上
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3楼2009-12-02 12:11:51
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mever

木虫 (正式写手)
★
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takala的Tag酶有单加镁离子的包装 货号好像是DR100系列
我们实验室就是用这种的
ISSR的话要调整的就多了
复性温度
镁离子浓度
模板质量
引物种类
都要仔细调试
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4楼2009-12-02 18:32:16
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hyde0706

木虫 (正式写手)
如果是比较稳定的PCR，可以用mix，操作简单而且稳定。如果需要考察条件，用mix就不方便了。mix最大的好处就是稳定、重现性好。
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5楼2009-12-02 19:12:06
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yxx41

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amisking(金币+3,VIP+0): 12-2 22:18
Takara的Mix应该不错，我一直用Takara的Taq酶之类的，效果很好。
Taq Mix确实不适合探索条件之用啊，还是老老实实自个一样一样加的好，所有条件都可控，而且说实话操作上注意些，应该说两种方式没有太大差别吧。
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内事不决问百度，外事不决问Google，横批：wikipedia
6楼2009-12-02 21:53:18
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