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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】请教一个用FMOC衍生氨基酸的问题
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sdlca

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】请教一个用FMOC衍生氨基酸的问题 已有2人参与

大家好，我这几天一直在做氨基酸的衍生实验，可是一直出不来结果，我把我的实验步骤给大家说一下，希望大牛们能给点建议，我头都快大了。

衍生试剂FMOC-Cl是FLuka的，配成20mM的乙腈溶液
17种氨基酸分别溶于PH=9的硼酸缓冲液，配成5mM的。
衍生过程就是取5ml的氨基酸溶液，然后加入10ml的FMOC。
在加FMOC的过程会出现浑浊，但是过一会，或者晃几下就好了。如果浑浊还存在的话，就再加点FMOC，浑浊也没了。
衍生2分钟后，用正戊烷萃取，取下层的溶液。
然后用硼酸缓冲液稀释。

电泳仪是BECKMAN的MDQ，毛细管柱是买的国产的，内壁无涂层，（柱子应该没什么问题，因为用这个柱子做演示实验，结果还可以）。
检测器是PDA，检测波长190-300nm。
电泳条件是NaOH、缓冲液、水分别冲洗2min，进样0.5psi、5s，25KV、30min。
出现峰特别的奇怪，选一个214nm的左旋精氨酸的电泳图给大家看看
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1楼 2009-11-26 17:59:19
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sdlca

铜虫 (初入文坛)
图片我不知道怎么发上去，呵呵，请大家看看这里吧
http://user.qzone.qq.com/5049108 ... ENT.QQ.2587_Mysrv.0
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2楼2009-11-26 18:03:33
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sdlca

铜虫 (初入文坛)
第一个峰肯定不是想要的峰，我觉得可能是FMOC没萃取干净，自身的峰。
我觉得条件什么的都和文献上面说的一样，但是就是出不了峰，真是不知道哪个地方出错了。
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3楼2009-11-26 18:05:20
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sdlca

铜虫 (初入文坛)
上面传的地址是我的QQ空间，在相册里面的电泳文件夹里面有L-精氨酸的谱图，呵呵，不好意思，有劳大家了
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4楼2009-11-26 18:07:31
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hcj000

新虫 (小有名气)
★
happy169(金币+1,VIP+0):谢谢参与，欢迎常来分析版 11-27 15:49
lz 我问一个跟你要问的不是很相关的问题，FMOC-cl虽然没有一些药物那么贵但是也不是很便宜。你一次要用10ml，不觉得浪费很大吗？非要要10ml吗？我觉得你可以适当的缩小比例。
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5楼2009-11-27 09:45:52
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sdlca

铜虫 (初入文坛)
呵呵，因为浓度低啊
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6楼2009-11-27 17:34:10
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wxp588

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你用的条件是有点问题的，FMOC氨基酸是在有低温处理的，要不会得不到产物或成份复杂的，我最近刚好在看相关的文献
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我发现原来我是做化学的
7楼2010-07-21 18:21:04
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小小静晶

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
那后来你的问题解决了吗？你的硼酸钠缓冲液是只有硼酸钠一个溶质吗？

发自小木虫IOS客户端
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8楼2015-12-27 11:25:14
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