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【求助】请教一个用FMOC衍生氨基酸的问题已有2人参与
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大家好,我这几天一直在做氨基酸的衍生实验,可是一直出不来结果,我把我的实验步骤给大家说一下,希望大牛们能给点建议,我头都快大了。 衍生试剂FMOC-Cl是FLuka的,配成20mM的乙腈溶液 17种氨基酸分别溶于PH=9的硼酸缓冲液,配成5mM的。 衍生过程就是取5ml的氨基酸溶液,然后加入10ml的FMOC。 在加FMOC的过程会出现浑浊,但是过一会,或者晃几下就好了。如果浑浊还存在的话,就再加点FMOC,浑浊也没了。 衍生2分钟后,用正戊烷萃取,取下层的溶液。 然后用硼酸缓冲液稀释。 电泳仪是BECKMAN的MDQ,毛细管柱是买的国产的,内壁无涂层,(柱子应该没什么问题,因为用这个柱子做演示实验,结果还可以)。 检测器是PDA,检测波长190-300nm。 电泳条件是NaOH、缓冲液、水分别冲洗2min,进样0.5psi、5s,25KV、30min。 出现峰特别的奇怪,选一个214nm的左旋精氨酸的电泳图给大家看看 |
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毛细管电泳 |
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2楼2009-11-26 18:03:33
3楼2009-11-26 18:05:20
4楼2009-11-26 18:07:31
5楼2009-11-27 09:45:52
6楼2009-11-27 17:34:10

7楼2010-07-21 18:21:04
8楼2015-12-27 11:25:14













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