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sdlca

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】请教一个用FMOC衍生氨基酸的问题 已有2人参与

大家好,我这几天一直在做氨基酸的衍生实验,可是一直出不来结果,我把我的实验步骤给大家说一下,希望大牛们能给点建议,我头都快大了。

衍生试剂FMOC-Cl是FLuka的,配成20mM的乙腈溶液
17种氨基酸分别溶于PH=9的硼酸缓冲液,配成5mM的。
衍生过程就是取5ml的氨基酸溶液,然后加入10ml的FMOC。
在加FMOC的过程会出现浑浊,但是过一会,或者晃几下就好了。如果浑浊还存在的话,就再加点FMOC,浑浊也没了。
衍生2分钟后,用正戊烷萃取,取下层的溶液。
然后用硼酸缓冲液稀释。

电泳仪是BECKMAN的MDQ,毛细管柱是买的国产的,内壁无涂层,(柱子应该没什么问题,因为用这个柱子做演示实验,结果还可以)。
检测器是PDA,检测波长190-300nm。
电泳条件是NaOH、缓冲液、水分别冲洗2min,进样0.5psi、5s,25KV、30min。
出现峰特别的奇怪,选一个214nm的左旋精氨酸的电泳图给大家看看
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sdlca

铜虫 (初入文坛)

第一个峰肯定不是想要的峰,我觉得可能是FMOC没萃取干净,自身的峰。
我觉得条件什么的都和文献上面说的一样,但是就是出不了峰,真是不知道哪个地方出错了。
3楼2009-11-26 18:05:20
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sdlca

铜虫 (初入文坛)

图片我不知道怎么发上去,呵呵,请大家看看这里吧
http://user.qzone.qq.com/5049108 ... ENT.QQ.2587_Mysrv.0
2楼2009-11-26 18:03:33
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sdlca

铜虫 (初入文坛)

上面传的地址是我的QQ空间,在相册里面的电泳文件夹里面有L-精氨酸的谱图,呵呵,不好意思,有劳大家了
4楼2009-11-26 18:07:31
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hcj000

新虫 (小有名气)


happy169(金币+1,VIP+0):谢谢参与,欢迎常来分析版 11-27 15:49
lz 我问一个跟你要问的不是很相关的问题,FMOC-cl虽然没有一些药物那么贵但是也不是很便宜。你一次要用10ml,不觉得浪费很大吗?非要要10ml吗?我觉得你可以适当的缩小比例。
5楼2009-11-27 09:45:52
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