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erictan2046

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助】RNA有那么难提取吗?苦恼

我想请问一下,RNA的提取有那么难提取么?有经验的各路大侠给点意见,我提取了很多次了都是降解的或者是没有条带的,是怎么回事呢?DEPC水配制是1000mlddH2O+1ml的DEPC(原溶液)。操作都是戴口罩和手套,液氮研磨和4°C离心,沉淀用-20°C来进行沉淀,抢头和离心管都是DEPC水浸泡过夜的,我想到底真的有那么难提取么??气死我了!
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shenye.judy

木虫 (正式写手)

★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 11-28 10:39
材料有问题吗?感觉一般操作的问题不是很大,快一点就行。我们对面实验室都不用DEPC处理的就提了,也提出来,但放不久,现提现用。还有就是方法问题。本人觉得CTAB法是很稳定的方法,我提植物材料的根,木本植物,也能提出来,很好,就是配试剂挺烦的。
12楼2009-11-28 10:27:39
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竹子9722

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我虽然不知道怎么回事,但是有过类似的经历吧。换个方法提取可能会成功的哦
2楼2009-11-25 14:44:30
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ljwei_163

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1,VIP+0): 11-25 19:43
-20度沉淀?你用的什么方法?
用TRIZOL就很好的,按说明书步骤就行了
电泳槽,移液器最好是RNA专用的
3楼2009-11-25 14:44:44
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liyong1981

金虫 (正式写手)


★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+2,VIP+0): 11-25 19:43
当然要-20度沉淀了,用TRIZOL也要这步的,楼主提的植物的吧,其实很简单啊,当年我提的一次性成功的,是不是你做胶的问题,建议用MOPS甲醛变形浇检测,效果会非常好。我不知道怎么发图的,我这里有我上学时候跑得RNA胶,·电泳槽应该用专用的,还有枪,电泳槽可以用氢氧化钠溶液浸泡,希望对你有帮助
4楼2009-11-25 15:13:30
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