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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助】RNA有那么难提取吗？苦恼
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erictan2046

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助】RNA有那么难提取吗？苦恼

我想请问一下，RNA的提取有那么难提取么？有经验的各路大侠给点意见，我提取了很多次了都是降解的或者是没有条带的，是怎么回事呢？DEPC水配制是1000mlddH2O+1ml的DEPC（原溶液）。操作都是戴口罩和手套，液氮研磨和4°C离心，沉淀用-20°C来进行沉淀，抢头和离心管都是DEPC水浸泡过夜的，我想到底真的有那么难提取么？？气死我了！
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1楼 2009-11-25 14:15:21
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竹子9722

木虫 (正式写手)
★
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我虽然不知道怎么回事，但是有过类似的经历吧。换个方法提取可能会成功的哦
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2楼2009-11-25 14:44:30
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ljwei_163

金虫 (正式写手)
★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0): 11-25 19:43
-20度沉淀?你用的什么方法?
用TRIZOL就很好的,按说明书步骤就行了
电泳槽,移液器最好是RNA专用的
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3楼2009-11-25 14:44:44
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
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1949stone(金币+2,VIP+0): 11-25 19:43
当然要-20度沉淀了，用TRIZOL也要这步的，楼主提的植物的吧，其实很简单啊，当年我提的一次性成功的，是不是你做胶的问题，建议用MOPS甲醛变形浇检测，效果会非常好。我不知道怎么发图的，我这里有我上学时候跑得RNA胶，·电泳槽应该用专用的，还有枪，电泳槽可以用氢氧化钠溶液浸泡，希望对你有帮助
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4楼2009-11-25 15:13:30
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
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请问楼主提的是什么组织？
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5楼2009-11-25 15:37:32
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pecky945

木虫 (正式写手)

建议换一套提取的试剂系统

★ ★ ★
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amisking(金币+2,VIP+0): 11-28 10:39
如果Trizol没有问题的话，建议换一套提取的试剂系统（氯仿、异丙醇、无水乙醇等）！
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宁静以致远！
6楼2009-11-25 15:53:35
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生命核心

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
移液器最好是RNA专用的,很关键
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7楼2009-11-25 18:36:24
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刘仕博

金虫 (著名写手)
★ ★
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司马诸葛(金币+1,VIP+0): 11-25 21:03
估计是方法不行吧。
我之前提取RNA的时候也是总也提不出来，那个时候还是用的试剂盒的，挺贵的。后来换了个方法，现在我提取RNA的时候口罩都不用，它也能出来。建议换个方法看看。
再就是做实验的时候一定要仔细，那个东西很容易就降解了
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生命在于折腾~
8楼2009-11-25 19:07:14
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laojiu9878

至尊木虫 (知名作家)

九牛
特别注意一点，一定要买好的酚，sigma最好，500多250ml，去蛋白效果非常好，酶去掉了，降解就少了。
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但愿人长久
9楼2009-11-26 08:05:00
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lzhwin

木虫 (正式写手)
★
amisking(金币+1,VIP+0): 11-28 10:39
楼主说一下是什么植物，不同的植物差别很大。水稻拟南芥怎么提怎么有。你要是提了些什么瓜果蔬菜之类的有些就会很麻烦，常用的trizol或者试剂盒未必奏效。可能需要楼主尝试不同的方法。文献里也有很多方法，建议楼主还是多查文献吧，否则只能使在重复错误
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10楼2009-11-27 11:39:05
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