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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 【求助】大极性的HPLC分离问题-可能是苷类
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liuna5239

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助】大极性的HPLC分离问题-可能是苷类

氯仿甲醇6:1展开有轻微拖尾现象RF=0.3，HPLC分离困难，95%的甲醇洗脱出峰。应该如何分离？烦请各位前辈指教
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1楼 2009-11-23 15:43:50
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seageat

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
liuna5239(金币+5,VIP+0): 11-26 20:47
472514568(金币+1,VIP+0):奖励积极回帖！ 11-28 10:55
C:M 6:1=12:2，极性不算大，Rf0.3左右，是可能有1个糖。HPLC95%出峰，和TLC极性有点对不上，该70%内出峰的。HPLC波长多少，吸收强度大吗？不一定是主要成分。
—————两点建议———
12：2的系统最好加点水，使水饱和，能明显改善成点性。
有反相TLC板可以试用下，毕竟有UV吸收的化合物是少数。
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2楼2009-11-25 20:59:17
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liuna5239

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by seageat at 2009-11-25 20:59:
C:M 6:1=12:2，极性不算大，Rf0.3左右，是可能有1个糖。HPLC95%出峰，和TLC极性有点对不上，该70%内出峰的。HPLC波长多少，吸收强度大吗？不一定是主要成分。
—————两点建议———
12：2的系统最好加点水， ...

谢谢你的回复，HPLC波长在600左右，进样量很少，所以强度应该不止600.我试了一下水饱和，成点性有所改善
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3楼2009-11-26 20:45:25
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liuna5239

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by seageat at 2009-11-25 20:59:
C:M 6:1=12:2，极性不算大，Rf0.3左右，是可能有1个糖。HPLC95%出峰，和TLC极性有点对不上，该70%内出峰的。HPLC波长多少，吸收强度大吗？不一定是主要成分。
—————两点建议———
12：2的系统最好加点水， ...

谢谢你的回复，HPLC波长在600左右，吸收强度还可以，我试了一下水饱和，成点性有所改善，谢谢
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4楼2009-11-26 20:47:26
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seageat

金虫 (正式写手)
★
472514568(金币+1,VIP+0):奖励积极回帖！ 12-1 23:01
........................波长600？？？？？？？？？？？nm到可见光了
波长，不是强度！！！主要想判断你的化合物类型
此外显色反应如何？（TLC用什么显色的）
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5楼2009-11-26 21:17:08
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liuna5239

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by seageat at 2009-11-26 21:17:
........................波长600？？？？？？？？？？？nm到可见光了
波长，不是强度！！！主要想判断你的化合物类型
此外显色反应如何？（TLC用什么显色的）

波长在210，硫酸显红色，氯化铁不显色
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6楼2009-11-26 21:26:14
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seageat

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢指点！ 11-27 01:58
liuna5239(金币+5,VIP+0): 11-28 08:30
o
基本可以确定：1.无酚羟基，2.无紫外吸收，3.MeOH末端截止波长210nm，出的峰是杂质峰，（外面有贴在讨论过）。
化合物可能是萜类的单糖苷，可以用反相open柱分离40-100%甲醇梯度（有反相板可以摸下具体条件，以70%甲醇展开），TLC：C-M-W检测。
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7楼2009-11-27 00:01:03
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liuna5239

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by seageat at 2009-11-27 00:01:
o
基本可以确定：1.无酚羟基，2.无紫外吸收，3.MeOH末端截止波长210nm，出的峰是杂质峰，（外面有贴在讨论过）。
化合物可能是萜类的单糖苷，可以用反相open柱分离40-100%甲醇梯度（有反相板可以摸下具体条件， ...

请问TLC的CMW检测是什么意思？不好意思，我不懂
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8楼2009-11-28 08:33:50
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seageat

金虫 (正式写手)
CMW=氯仿：甲醇：水
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9楼2009-12-01 21:29:34
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zy.0111

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):3Q 2010-02-02 20:44
6：1的极性不算大啊。一，有可能是连有糖有，另外是结构中有酸碱基团
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10楼2010-02-02 16:04:33
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