24小时热门版块排行榜    

查看: 938  |  回复: 4
当前主题已经存档。

woxinfeiyang

木虫 (正式写手)

[交流] 有用三氯乙酸沉淀分离蛋白的吗?需要多大的浓度?

有用三氯乙酸沉淀分离蛋白的吗?需要多大的浓度?
我的样品粘度很大,想从样品中把蛋白分离出来,用的TCA法沉淀的,但是沉淀不完全,请问高手TCA的浓度一般需要多大啊,像我们这粘度较大的样品需要多大啊!
另外像我们这种样品有其他好的分离蛋白的方法么?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qingfengwu

金虫 (小有名气)


woxinfeiyang(金币+1,VIP+0):样品本身粘度就很大 11-23 11:53
你的样品粘度很大,表明很可能已经被DNA污染了,导致粘度很大,纯蛋白绝大多数情况下是不会粘稠的,至少我从来没有遇到过。
2楼2009-11-23 11:41:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qingfengwu

金虫 (小有名气)


woxinfeiyang(金币+1,VIP+0):恩,我这也是微量蛋白,大概含量约0.1%左右 11-23 11:55
三氯乙酸沉淀我们也有用的,但是都是分离微量蛋白的,比如检测一些细胞或活组织的分泌因子什么的,就用三氯乙酸沉淀下来,进行浓缩。对于一般的样品,没有什么必要用这种沉淀方法。如果你确实需要的话,我会去查一下我的试验记录本再告诉你。
3楼2009-11-23 11:46:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qingfengwu

金虫 (小有名气)


woxinfeiyang(金币+1,VIP+0):谢谢,我的样品本身就是粘度很大,和蛋白没关系,并且蛋白含量很低,如果直接用lowry法测定,里面有影响测定的粒子,就是亚硫酸根离子,影响测定,所以,我只能把蛋白沉淀分离出来再测定,这也是没有办法的办法了 11-23 11:53
三氯乙酸10%-15%这种浓度就可以了,不要太高了。对不起TCA法没有用过。

你是不是先13000rpm 15min把可能的DNA污染离心下来。再看看你的蛋白是否还粘稠。我觉得不太可能。
4楼2009-11-23 11:49:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

woxinfeiyang

木虫 (正式写手)

我是用TCA(三氯乙酸)-Doc(脱氧胆酸钠)法做的
我们的离心机最多能达到一万,应该可以吗?
5楼2009-11-23 11:57:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 woxinfeiyang 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研化学308分求调剂 +3 你好明天你好 2026-03-23 4/200 2026-03-23 10:30 by 你好明天你好
[考研] 070300,一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
[考研] 317求调剂 +12 申子申申 2026-03-19 18/900 2026-03-22 22:23 by luoyongfeng
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 4/200 2026-03-22 10:25 by QGZDSYS
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 22 350 本科985求调剂,求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 316求调剂 +6 梁茜雯 2026-03-19 6/300 2026-03-21 06:32 by Ecowxq666!
[考研] 307求调剂 +3 wyyyqx 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:20 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕,总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 288求调剂 +16 于海海海海 2026-03-19 16/800 2026-03-20 22:28 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
信息提示
请填处理意见