24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 953  |  回复: 4
当前主题已经存档。

woxinfeiyang

木虫 (正式写手)

[交流] 有用三氯乙酸沉淀分离蛋白的吗?需要多大的浓度?

有用三氯乙酸沉淀分离蛋白的吗?需要多大的浓度?
我的样品粘度很大,想从样品中把蛋白分离出来,用的TCA法沉淀的,但是沉淀不完全,请问高手TCA的浓度一般需要多大啊,像我们这粘度较大的样品需要多大啊!
另外像我们这种样品有其他好的分离蛋白的方法么?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qingfengwu

金虫 (小有名气)


woxinfeiyang(金币+1,VIP+0):样品本身粘度就很大 11-23 11:53
你的样品粘度很大,表明很可能已经被DNA污染了,导致粘度很大,纯蛋白绝大多数情况下是不会粘稠的,至少我从来没有遇到过。
2楼2009-11-23 11:41:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qingfengwu

金虫 (小有名气)


woxinfeiyang(金币+1,VIP+0):恩,我这也是微量蛋白,大概含量约0.1%左右 11-23 11:55
三氯乙酸沉淀我们也有用的,但是都是分离微量蛋白的,比如检测一些细胞或活组织的分泌因子什么的,就用三氯乙酸沉淀下来,进行浓缩。对于一般的样品,没有什么必要用这种沉淀方法。如果你确实需要的话,我会去查一下我的试验记录本再告诉你。
3楼2009-11-23 11:46:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qingfengwu

金虫 (小有名气)


woxinfeiyang(金币+1,VIP+0):谢谢,我的样品本身就是粘度很大,和蛋白没关系,并且蛋白含量很低,如果直接用lowry法测定,里面有影响测定的粒子,就是亚硫酸根离子,影响测定,所以,我只能把蛋白沉淀分离出来再测定,这也是没有办法的办法了 11-23 11:53
三氯乙酸10%-15%这种浓度就可以了,不要太高了。对不起TCA法没有用过。

你是不是先13000rpm 15min把可能的DNA污染离心下来。再看看你的蛋白是否还粘稠。我觉得不太可能。
4楼2009-11-23 11:49:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

woxinfeiyang

木虫 (正式写手)

我是用TCA(三氯乙酸)-Doc(脱氧胆酸钠)法做的
我们的离心机最多能达到一万,应该可以吗?
5楼2009-11-23 11:57:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 woxinfeiyang 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +8 小聂爱学习 2026-04-11 12/600 2026-04-14 18:25 by 小聂爱学习
[考研] 各位老师好,求调剂,本科211,一志愿天津大学生物与医药学硕,差两名录取。 +11 路六六jjj 2026-04-13 11/550 2026-04-14 16:01 by zs92450
[考研] 求调剂 +12 何气正 2026-04-13 13/650 2026-04-14 14:47 by zs92450
[基金申请] 2026 WR青拔 +3 冬日阳光CAS 2026-04-09 6/300 2026-04-13 18:40 by liuchb715
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +8 慕绝cc 2026-04-09 8/400 2026-04-13 14:08 by 张zhihao
[考研] 生物学调剂 +11 小冉要努力 2026-04-10 13/650 2026-04-13 11:46 by 电化学及催化
[考研] 368化学求调剂 +14 wwwwabcde 2026-04-07 15/750 2026-04-13 08:36 by lhj2009
[考研] 求调剂288 +7 ioodiiij 2026-04-10 9/450 2026-04-13 08:33 by Hayaay
[考研] 一志愿厦大0856,306求调剂 +15 Bblinging 2026-04-11 15/750 2026-04-11 22:53 by 314126402
[考研] 284求调剂 +11 archer.. 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:23 by 蓝云思雨
[考研] 工科273调剂 +6 X1999 2026-04-09 7/350 2026-04-11 10:23 by zhq0425
[考研] 281求调剂 +11 觉得好的吧 2026-04-10 11/550 2026-04-11 09:35 by 逆水乘风
[考研] 调剂 化学 307 +21 73372112 2026-04-09 23/1150 2026-04-10 23:53 by wj165256
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +3 加大号饭盒袋 2026-04-10 3/150 2026-04-10 22:23 by 286640313
[考研] 368求调剂 +3 17385968172 2026-04-10 3/150 2026-04-10 20:12 by 电子奥德彪
[考研] 计算机类求调剂,22408-274分 +7 上岸de小虫 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:56 by fxue1114
[考研] 调剂申请086000一志愿西北农林科技大学生物与医药320分-本科齐鲁工业大学 +3 美美女士 2026-04-09 3/150 2026-04-10 10:31 by liuhuiying09
[考研] 材料化工总分334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 20:19 by maddjdld
[考研] 求机械专硕297第二批调剂 +5 拾柒12。 2026-04-08 5/250 2026-04-09 16:43 by 允当适度
[考研] 求调剂 +3 猪肉墩粉条cc 2026-04-08 4/200 2026-04-09 10:05 by 猪肉墩粉条cc
信息提示
请填处理意见