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阴性PCR问题！
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最近做质粒的构建，其中有个启动子的替换，把启动子换为ADH的启动子，ADH1导入进去了，而ADH-TT这个终止子在做菌落PCR鉴定时，阴性对照一直出现 和目的条带在同一条线的条带，就是比加了模板的要淡些。 现已经排除试剂的污染和无菌操作有问题的可能。因为我把实验试剂都换了个遍，连操作的人都换过，结果还是一样。 不过更不明白的是我把阴性对照的水换为自来水却没有条带的出现。这是因为超纯水的原因吗？那为什么用其他差不多的条带的DNA为模板PCR扩增时，却没有这个问题。 [ Last edited by amisking on 2009-11-22 at 12:05 ] |
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