24小时热门版块排行榜    

查看: 509  |  回复: 9
当前主题已经存档。

mandy992

新虫 (初入文坛)

[交流] 克隆后出现了非特异条带

用的peasy-t1载体,kana抗生素。片段四百多,结果克隆后菌液pcr跑电泳,出来了两条带,一个600多,一个1100多,望大家指教~

[ Last edited by amisking on 2009-11-21 at 22:49 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangao

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
do control experiment
2楼2009-11-22 13:10:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laojiu9878

至尊木虫 (知名作家)

九牛


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
原因很多,如菌落不纯,引物专一性差等。
但愿人长久
3楼2009-11-23 08:38:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王雨云

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
也可能是退火温度高了吧
4楼2009-11-23 15:40:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

neon_alone

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你的菌液PCR条件和单独P 的时候条件是不是一样的?做个control insert对照,
5楼2009-11-23 15:47:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mandy992

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by neon_alone at 2009-11-23 15:47:
你的菌液PCR条件和单独P 的时候条件是不是一样的?做个control insert对照,

条件不同,因为引物不一样。。。恩,好主意
6楼2009-11-24 08:46:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mandy992

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 王雨云 at 2009-11-23 15:40:
也可能是退火温度高了吧

退火温度高会出现非特异?你是想说低吗
7楼2009-11-24 08:48:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王雨云

金虫 (小有名气)

嗯,说反了,呵呵!
8楼2009-11-24 10:21:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

neon_alone

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
应该用相同的引物啊,你用你单独P的时候那个引物试试,
你用的通用引物,肯定片段会比目的片段大的吧,吧整个MCS上的序列都进去了,是吧?。
9楼2009-11-24 10:41:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

你可以加一个空质粒对照,或者感受态菌的对照,有时候是你引物把这些扩出来而已,只要目的条带有就行了
10楼2009-11-24 12:02:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mandy992 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿070300浙大化学358分,求调剂! +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +11 梨花珞晚风 2026-03-17 11/550 2026-03-22 17:42 by luoyongfeng
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +5 脱颖而出 2026-03-16 17/850 2026-03-22 15:18 by 脱颖而出
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 一志愿南大,0703化学,分数336,求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 299求调剂 +4 某某某某位 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:30 by barlinike
[考研] 299求调剂 +6 △小透明* 2026-03-17 6/300 2026-03-21 02:42 by JourneyLucky
[考研] 二本跨考郑大材料306英一数二 +3 z1z2z3879 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:29 by JourneyLucky
[考研] 材料 336 求调剂 +3 An@. 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:39 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学,080502,354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 271材料工程求调剂 +8 .6lL 2026-03-18 8/400 2026-03-21 00:58 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 司空. 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:08 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考博] 申博26年 +3 八6八68 2026-03-19 3/150 2026-03-19 19:43 by nxgogo
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
信息提示
请填处理意见