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安徽耀坤

铁虫 (初入文坛)

[交流] 96通道生物节律光度测定监测系统

生物节律光度测定监测系统是一种用于检测和分析生物样本(如细胞、组织或转基因动物)中生物节律性发光信号的高通量科研设备,广泛应用于分子生物学、细胞生物学及神经药理学等领域,用于研究基因调控、昼夜节律机制及**发生过程。该仪器通过监测携带荧光素酶报告基因的实验材料所发出的生物发光信号,实现对振幅、周期、相位‌等节律参数的长时间连续记录与分析。系统通常配备自动旋转台和光电倍增管,可在恒温环境下对多个样品进行无人值守的动态监测。
详情介绍:
功能特点
高通量与自动化:系统自动控制旋转台和数据采集,支持无人值守长时间运行,时长可达数周。
灵活的实验设计:可独立启动或停止任一通道,支持在实验中途中断采集(如添加**处理),处理完成后继续采集,且不影响后续数据分析。
测量频率可调:用户可根据实验需求设置采集频率,范围从每分钟一次到每小时一次‌,适应不同动态过程的研究。
自研的信号处理算法:能自动补偿实验中的基线漂移和信号衰减,提升数据可靠性,并从中提取清晰的节律周期和时相信息。
数据可视化与导出:采集过程中可实时查看多个通道的数据曲线,双击可查看详细记录;分析结果可导出至Excel进行统计处理,原始数据也可导入软件进行周期图、活动图等专业分析。
人机交互友好:配备图形化操作界面和在线帮助文档,便于研究人员快速上手,也适用于本科生科研能力培养。
应用领域
昼夜节律基因功能研究
神经药理学中的**干预效应评估
转基因动物模型的节律表型分析
大规模基因剔除/诱变筛选平台建设
构建报告细胞系
基本流程
使用携带节律基因启动子驱动荧光素酶表达的转基因细胞,
如:
Bmal1::dluc:监测 Bmal1 基因的节律性表达
Per2::Luc:反映 Per2 基因的振荡动态
这些细胞可通过慢病毒感染构建,并经筛选获得高振幅、稳定表达的单克隆细胞系。
同步化处
为使细胞群体节律一致,需进行‌节律同步‌,常用方法包括:
血清休克:用高浓度血清短暂刺激细胞
Dexamethasone(地塞米松)处理‌:加入100 nM地塞米松溶液1–2小时,随后更换为常规培养基
温度或pH脉冲:适用于特定细胞类型
加载样品与启动记录
将同步化后的细胞接种于35 mm培养皿中,加入含D-luciferin底物的无酚红培养基(避免光干扰)
将培养皿放入系统置于恒温(通常36–37°C)环境中
启动自动旋转台,使光电倍增管依次检测各通道的生物发光信号
数据采集设置
设置采集频率:每20–60分钟一次,持续记录5–10天
系统自动补偿基线漂移和信号衰减,确保数据稳定性
支持实验中途加药干预,处理后可继续采集,不影响前后数据分析
数据分析
使用配套软件进行曲线拟合
提取关键参数:周期长度(Period)、振幅(Amplitude)、相位(Phase) 和阻尼率(Damping Rate)
可比较不同处理组(如**、基因敲除)之间的节律差异。

96通道生物节律光度测定监测系统
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