24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 830  |  回复: 11
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

09021122

木虫 (正式写手)

[交流] 克隆注意!

克隆注意几点

说说我的实验经验:
1:在做克隆实验时感受态细胞不能反复冻融,最好再感受态细胞制备好后分装成小分,在做实验时拿出一份即可。
2:配连接体系时不一定要按照书上的说的十微升的体系,只要结果很好,用少的体系也无妨,我用的就是2.5微升的体系,效果非常好,这样可以省很多费用。
3:在涂平板时加的X-gal和IPTG一定要是现配的,不然的话可能会长不出菌,如果加Amp的话。
4:在涂平板时最好设置一个梯度,即加菌液的体积要有一个梯度,而且最好留一部分菌液保存起来,以备后用。
等等吧,以上只是我在实验时遇到的一些问题和看法,希望对大家有用处!
回复此楼

» 猜你喜欢

雄关漫道真如铁,而今迈步从头越
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

09021122

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by zier1011 at 2009-11-19 13:46:
楼主,请教一下,IPTG和X-Gal你们是配到培养基中去呢,还是涂布到平板表面呢?
我们实验室一直是涂在平板表面,我想问问,配到培养基中不行吗?涂到表面是出于什么考虑,仅仅是从成本考虑吗?——IPTG和X-Gal都比 ...

是涂在平板上的,它有浓度的限制,如果直接混合于培养基中,不但浓度不同,
而且效果不一定好。两种试剂的价格很高,所以一般还是涂于表面。
雄关漫道真如铁,而今迈步从头越
8楼2009-11-19 18:10:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

龙井茶室

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
求2.5ul酶连体系
2楼2009-11-19 13:34:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zier1011

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
楼主,请教一下,IPTG和X-Gal你们是配到培养基中去呢,还是涂布到平板表面呢?
我们实验室一直是涂在平板表面,我想问问,配到培养基中不行吗?涂到表面是出于什么考虑,仅仅是从成本考虑吗?——IPTG和X-Gal都比较贵。
花还香香的
4楼2009-11-19 13:46:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chjvke

铜虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也想知道2.5ul的体系,还想知道你设涂的菌液梯度时,一般设几个,不离心后涂吗?
5楼2009-11-19 14:01:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本科211,报考085601-310分 +13 ararak 2026-04-13 13/650 2026-04-14 09:28 by 852137818
[考研] 085600材料与化工349分求调剂 +16 李木子啊哈哈 2026-04-12 17/850 2026-04-14 09:11 by fenglj492
[教师之家] 转长聘了 +4 简单化xn 2026-04-13 4/200 2026-04-14 08:27 by syl200707
[考研] 271求调剂 +34 2261744733 2026-04-11 40/2000 2026-04-13 23:15 by pies112
[考研] 274求调剂 +8 山阿蔓 2026-04-07 8/400 2026-04-13 20:32 by biomen
[考研] 297工科,求调剂? +13 河南农业大学-能 2026-04-12 13/650 2026-04-13 14:12 by dingyanbo1
[考研] 368化学求调剂 +14 wwwwabcde 2026-04-07 15/750 2026-04-13 08:36 by lhj2009
[考研] 322求调剂,08工科 +4 今天是个小号 2026-04-08 4/200 2026-04-13 00:20 by baobaoye
[考研] 305求调剂 +6 77Qi 2026-04-07 6/300 2026-04-12 02:30 by 秋豆菜芽
[考研] 求调剂 +11 翩翩一书生 2026-04-09 11/550 2026-04-11 19:57 by 逆水乘风
[考研] 352 求调剂 +6 yzion 2026-04-11 8/400 2026-04-11 16:24 by 明月此时有
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +16 叶zilin 2026-04-10 16/800 2026-04-11 11:04 by may_新宇
[考研] 283求调剂,工科! +12 苏打水7777 2026-04-08 12/600 2026-04-11 10:28 by 逆水乘风
[考研] 22408 352分求调剂0854类 +4 努力的夏末 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:57 by zhq0425
[考研] 一志愿京区985,085401,与本科专业一致,电子信息工程, +4 阳光开朗的男孩 2026-04-10 4/200 2026-04-10 18:27 by shenrf
[考研] 344求调剂 +7 丶风雪夜归人丶 2026-04-09 7/350 2026-04-10 12:05 by pengliang8036
[考研] 考研调剂 +13 冰冰,,, 2026-04-07 13/650 2026-04-09 17:01 by Lilly_Li
[考研] 328求调剂 +17 lftmya 2026-04-07 18/900 2026-04-09 08:05 by 5268321
[考研] 生物学学硕,初试351分,求调剂 +4 …~、王…~ 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:49 by limeifeng
[考研] 求调剂 +11 wwwwabcde 2026-04-07 11/550 2026-04-07 23:16 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见