| 查看: 914 | 回复: 4 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
daifeng银虫 (小有名气)
|
[交流]
DNA提取的问题
|
||
|
求助各位虫友，本人提克雷伯杆菌N天了可是一直提不出来，我采用的是CTAB法，步骤如下： 1、过夜培养菌液取1.5毫升装EP管，12000转离心2MIN，弃菌液。 2、菌体加567微升TE,吹打使充分重悬。加30微升 10%SDS,3微升蛋白酶K,37度水浴一小时。 3、加100微升5M氯化钠，80微升CTAB/NaCL溶液，混匀，65度，水浴10MIN。 4、加等体积氯仿/异戊醇，混匀，12000转，离心5MIN。 5、留上清，加等体积的酚：氯仿，混匀，12000转，离心5MIN。 6、留上清，加0.6倍体积的异丙醇，轻轻颠倒混合至看到白色DNA沉淀析出 7、轻轻倒掉异丙醇，DNA沉淀用70%乙醇洗涤 8、12000转离心1MIN，倒掉乙醇，风干使乙醇挥干。 9、加50-100微升无菌水溶解DNA. 可是在第4步离心后，没有分层，只有白色的絮状沉淀悬浮。我加长离心时间也依然如此。不知哪位大侠能指点，不胜感激！ |
回复此楼» 猜你喜欢
260求调剂
已经有4人回复
-
一志愿华中农业071010，320求调剂
已经有19人回复
-
304求调剂
已经有7人回复
-
求博导｜生物质基多孔碳/超级电容方向，已有相关成果，寻能源材料/碳材料方向老师
已经有3人回复
-
二苯甲酮酸类衍生物
已经有6人回复
-
接受任何调剂
已经有4人回复
-
一志愿中科大材料与化工，353分还有调剂学校吗
已经有12人回复
-
320求调剂
已经有4人回复
-
295分求调剂
已经有5人回复
-
294求调剂
已经有8人回复
09021122
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2064.5
- 红花: 1
- 沙发: 1
- 帖子: 518
- 在线: 113.5小时
- 虫号: 856621
- 注册: 2009-09-25
- 性别: GG
- 专业: 系统生物学
2楼2009-11-18 22:01:59
3楼2009-11-18 22:32:43
4楼2009-11-18 22:53:59
5楼2009-11-20 21:02:52
20