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有关蛋白质和小分子作用的问题
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| 想证明某种药物小分子是作用于我的蛋白质（一种核受体）的，可以通过那些实验来验证？向大家请教！ |
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2楼2009-11-18 21:13:38
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4楼2009-11-19 08:13:40
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foreverjohn
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试验 步骤
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tancf(金币+5,VIP+0):非常感谢！ 11-21 12:26
tancf(金币+5,VIP+0):非常感谢！ 11-21 12:26
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（1）共定位： 化学小分子结合受体做confocal确定共定位是比较困难的，确实是需要交联的，但是具体交联的步骤不太清楚。如果是多肽或者内源性蛋白就容易的多，但是这个是不能证明有结合的，只能证明是有可能在一起。 （2）前面几位的意见非常好，看来都是学药学的，SPR，NMR都是非常好的证明方法，只是听说过，自己没有怎么做过。这些是证明binding所需要的。 （3）上面有个虫子说用生物素标记的方法，这个我觉得敏感性不够高，用同位素标记比较好， 我们现在做一个配体和一个受体确定两者间的关系有很多种方法，你可以去google一下，或者去查一下教科书，配体受体的定义里面都有好几条，你要一一按照那几条去做，在所有这些方法中最经典的一个试验就是同位素标记试验，然后和你的那个核受体共孵育，然后检测。 （4）有条件的话去做一下受体的结晶，crystal structure的分析对于药物来讲非常重要，解析出来以后，你用计算机计算出核受体的一些口袋结构啊，特殊结构啊，用你的化学小分子的一些基团去比对，看看能不能有效结合上去。 所有这些试验全部完成，相信绝对是个top article。 |
8楼2009-11-20 13:14:51
