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无学论hh

新虫 (初入文坛)

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专业: 微生物生理与生物化学

[求助] 纯化表达

我是做β半乳糖苷酶的纯化，我的蛋白是109.9kad二聚体，加完iptg后16℃诱导16h，然后用20mm，50mm，100mm咪唑洗杂，用250mm咪唑洗下目的蛋白，也跑sds-page验证了，但是比酶活很低只有0.3u/mg，刚破碎得到的粗酶液酶活为30u/ml，我看文献中差不多大小的相同的酶，他们是30摄氏度左右培养12-20h，我想会不会是温度的问题我也试了一下，但是发现在20mm咪唑洗脱液中酶活很高，250mm处几乎没有酶活且蛋白含量很低，我接下来该咋办
@天使托发自小木虫手机客户端

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