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liyong1981

金虫 (正式写手)


[交流] 质粒酶切!

我直接不酶切跑电泳,和用ECORI酶切(单酶切位点),跑出来的大小有差别么?就是环状的质粒和线性的DNA片段,在琼脂糖胶上的观察有差异么》?

[ Last edited by amisking on 2009-11-14 at 22:21 ]
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


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引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2009-11-14 17:14:
会不会是因为双链的环状质粒只被切开了单链?就像一个字母Q

质粒不酶切跑出三条带分别是超螺旋,开环,复制中间体。单酶切会出现线性,因此会不一样。如果酶切出现两条带,应该是酶切不完全导致的,加长酶切时间,点maker看看结果怎么样。另外,个人认为,限制性内切酶识别酶切位点是识别双链上的碱基对的,应该不会出现只切断一条链的情况吧。
Thank-you,so-blue.
11楼2009-11-15 10:51:07
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小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0):谢谢交流 11-14 20:37
我认为是一样的,琼脂糖跑出来是bp的大小,单酶切的话,环状的和线性的碱基数没有变化,条带应该是一样的。
2楼2009-11-14 16:30:10
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0):谢谢交流 11-14 20:38
构象不一样,理论上会有差别
但是也得考虑你配的胶的浓度,涉及分辨率的问题
3楼2009-11-14 16:47:45
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hrbd1985

铁虫 (初入文坛)

★ ★ ★
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1949stone(金币+2,VIP+0):同意 11-14 20:38
有,环状的比线性的跑得快!!!
4楼2009-11-14 16:51:38
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