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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒线性化
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张不胖.

新虫 (初入文坛)
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质粒线性化
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乙醇沉淀法回收DNA
①50 μl酶切体系中加入5 μl 3M 乙酸钠混匀；
加入2倍体积(100μl)预冷无水乙醇，混匀后-20C静置30 min;
②12000 rpm 4C 20 min去上清；
③加入750 ul(12 离心后体积）预冷的无水乙醇，混匀12000rpm 4℃ 20 min离心，去上清；
④自然晾干，加入1xTE buffer (pH 8.0)20μl溶解，DNA沉淀，测浓度。
切胶回收试剂盒回收浓度很低很低，我昨天有用乙醇沉淀法试了一下，我看不到DNA，切了2000ng，回收浓度也不是很高，22ng/ul，目前还需确认一下是不是回收出来了，请问乙醇沉淀法在这个基础上怎么再提高一下浓度呢
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1楼 2025-12-16 08:47:57
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火星怪兽

新虫 (初入文坛)
★
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18楼2025-12-17 05:21:54
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山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
第二步开始换个DNA柱子代替离心，回收率会高很多
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23楼2026-04-03 09:34:52
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muchong8882楼
2025-12-16 08:49   回复  
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三分之二1233楼
2025-12-16 08:52   回复  
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建辉_19984楼
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zero4065楼
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学员j30oDr6楼
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Michael9897楼
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麦兜12128楼
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tfang9楼
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yudaoqian8810楼
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jinchengzi11楼
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gordon39912楼
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wyj97013楼
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toppaper14楼
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XG-WUST15楼
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戳不豆子0116楼
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火星怪兽17楼
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cupbzhuwei19楼
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三磷酸-腺苷20楼
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bjdxyxy22楼
2025-12-19 07:12   回复  
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