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[交流]
大家过柱子时遇到过层析柱突然压升或效率下降吗?
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最近用制备柱纯化样品时,层析柱的柱压莫名其妙升高,流速也变慢,收集的组分纯度也不如之前,折腾了一下午还没完全解决,真是让人头疼。感觉这类问题在实际操作中挺常见的,想和大家一起讨论讨论可能的原因和各自的经验。 我回想了一下操作过程,怀疑可能是样品里有细微颗粒或者溶解不完全的物质,在柱头慢慢堆积形成了堵塞;或者是流动相中的缓冲盐析出,在填料间隙造成了阻塞。当然,也有可能是我自己装柱时没装均匀,留下了隐患。另外,层析柱如果使用时间较长,填料本身会不会发生塌陷或板结,也会导致柱效下降? 遇到这类问题,大家一般是怎么应急处理的呢?是尝试反冲,还是挖掉柱头部分填料更换新的?对于预防,除了加强样品前处理(过滤、离心等)和注意缓冲盐浓度,在柱子日常维护和保存方面,有没有什么特别实用的小技巧? |
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